Potenciometria

Universidad de Concepción
Facultad de Ingeniería Agrícola
Departamento de Agroindustrias

LABORATORIO Nº7
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR
“DETERMINACIÓN DE FOSFATO EN HOJAS DE VEGETALES”

INTRODUCCIÓN
El fósforo es un elemento esencial para los seres vivos, y los procesos de la fotosíntesis de las plantas, como otros procesos químicos de los seres vivos, los cuales no se puedenrealizar sin ciertos compuestos en base a fósforo. En la naturaleza se encuentra formando parte de los minerales o de los componentes orgánicos de los tejidos vivos como huesos y dientesSin la intervención del fósforo no es posible que un ser vivo pueda sobrevivir. El fósforo es un elemento que se puede encontrar en las estructuras del ADN de los organismos. El fósforo es uno de los elementos másimportantes para los sistemas biológicos ya que forma parte de moléculas tan importantes como los ácidos nucleicos (AND,ARN), el ATP y otros compuestos fosforados. Además juega un papel especial en el metabolismo energético de los seres vivos, pues al transferirse un ión fosfato a una molécula de ADP se origina una molécula de ATP, rica en energía fácilmente transportable.
Hay grandes cantidades defósforo contenido en el organismo, sobre todo en los ácidos nucleicos ARN y AND, y en la membrana en forma de fosfolípidos.
La biosfera ofrece varias opciones de energía para el desarrollo y vida de organismos. Es ahí donde aparece el fósforo. Es necesario en la biosfera porque aunque no es un constituyente de las proteínas, éstas no pueden formarse sin él, ya que requieren del enlace defosfato de alta energía en forma de ATP.

OBJETIVOS GENERALES

* Determinar el fósforo inorgánico u ortofosfatos en una muestra de vegetal.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

* Determinar la absorbancia entre 650 nm y 950 nm, usando la solución blanco (solución que no se le agrego fosforo) y la solución más concentrada.
* Graficar los datos, absorbancia versus longitud de onda y determinar lalongitud de onda de trabajo.
* Leer absorbancia de todas las soluciones a λ de trabajo obtenida.
* Graficar los datos, absorbancia versus concentración y trazar la curva de calibración.
* Por interpolación gráfica determinar la concentración de fosforo en el extracto.
* Informar resultado en %P y %P2S4

MATERIALES

*
* Muestra de vegetal deshidratado
* Balanzaanalítica BJ-2200C
* Espatula
* Tubo de centrifuga 50 mL
* Acido acético 2% v/v
* Agitador de acción reciproca Mistal Multi-Mixter
* Soporte universal
* Embudo
* Papel Watman Nº 2
* Vaso precipitado 25 mL
* Pipeta total 5 mL
* 7 Matraces aforados 50 mL
* Reactivo mezclado
* Agua destilada
* Solución Fosforo 2,5 ppm
* Bureta 50 mL
* Gradilla* 3 Tubos de ensayo
* Espectrofotómetro plus Melertech Sp-830

PROCEDIMIENTO

* Preparación de la muestra
* Se tomó el tubo de centrifuga, se pesó 0,200 g de muestra vegetal deshidratada y se traspasó al tubo.
* Se colocó 25 mL de ácido acético 2% v/v, se cerró y se ubicó en el agitador de acción recíproca y se dejó actuar por 10 minutos.
* Se filtró el contenido del tuboen un vaso precipitado de 25 mL.
* Se paso una alícuota de 5 mL a un matraz aforado de 50 mL, se agregó 5 mL de “reactivo mezclado” y se completó el volumen con agua destilada.
* Se agitó para lograr la homogeneidad y se colocó en la oscuridad durante 20 minutos para que desarrollara el color azul.

* Preparación de la curva de calibración
* Se tomó 6 matraces aforados de 50 mL yse tabularon, se agrego respectivamente las siguientes cantidades de fosforo 0 mL, 2 mL, 4 mL, 6 mL, 8 mL, 10 mL.
* Luego se agrego en cada tubo 5 mL de reactivo cromogenico o de mezclado” luego se enraso con agua agua destilada.
* luego se dejaron en oscuridad por aproximadamente 20 min.

* Determinación de la longitud de trabajo (espectrograma)
* Se tomó el matraz con la...