Ppractica:reparación de medios de cultivo

Práctica 4:
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
INTRODUCCIÓN:
Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el
desarrollo de los microorganismos. Una vez que ha sido preparado, un medio de cultivo
puede ser inoculado (es decir, se le añaden organismos) y a continuación incubado en
condiciones que favorezcan el crecimiento microbiano. El crecimiento de losmicroorganismos es el cultivo. Un cultivo axénico o puro contiene un único tipo de
microorganismos.
Los medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y deben estar exentos de cualquier microorganismo contaminante.
Los medios de cultivo contienen como mínimo: carbono, nitrógeno, azufre, fósforo
y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertasvitaminas y otras sustancias
inductoras del crecimiento. También se añaden colorantes que actúan como indicadores
para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de
unas bacterias y no de otras.
El agar es el principal agente solidificante utilizado en medios bacteriológicos. Se
disuelve completamente a 100°C y se solidifica al enfriarse a 40°C.
De acuerdoa su consistencia, los medios de cultivo pueden clasificarse en:
• Líquidos: Se utilizan para el crecimiento de cultivos puros en lote. Se denominan
caldos de cultivo y no tienen agar en su formulación.
• Semisólidos: Contienen 0.5% de agar en su formulación. Se utilizan para estudiar la
movilidad de las bacterias (presencia o ausencia de flagelo).
• Sólidos: Contienen de 1.5 a 2% de agar ensu formulación. Estos medios
inmovilizan a las células, permitiéndoles crecer y formar masas aisladas visibles
llamadas colonias. Las colonias permiten al microbiólogo reconocer la pureza del
cultivo; las placas que contengan más de un tipo de colonia no provienen de un
cultivo puro. Las placas de agar también se utilizan para la determinación de células
viables (recuento en placas).
Deacuerdo a su composición, los medios de cultivo pueden clasificarse en:
• Definidos: es aquél medio de cultivo del cual se conoce su composición exacta. Son
muy utilizados en estudios fisiológicos. Los medios mínimos son medios definidos
que únicamente le proporcionan al microorganismo los nutrientes necesarios para
crecer, pero no para desarrollarse óptimamente.
• Complejos: es aquél del cualno se conoce la composición exacta del medio. A
menudo, los medios complejos emplean sangre, leche, extracto de levaduras,
extracto de carne u otras sustancias muy nutritivas pero de las cuales se desconoce
la composición química exacta. Estos medios son muy utilizados para cultivar
bacterias desconocidas o bacterias de requerimientos nutricionales muy complejos.
De acuerdo a su función, losmedios de cultivo se clasifican como:
• Medios selectivos: Son aquéllos que poseen uno o más componentes añadidos, los
cuales inhibirán o prevendrán el crecimiento de ciertos tipos de especies de
bacterias y/o promoverán el crecimiento de las especies deseadas. Uno puede ajustar
las condiciones físicas de un medio de cultivo tales como el pH, la temperatura, para
hacerlo selectivo para losorganismos de interés.
• Medios diferenciales: Permiten al investigador distinguir entre diferentes tipos de
bacterias con base en alguna característica observable en su patrón de crecimiento
en el medio, ya sea por producción de algún pigmento o por cambios de color en el
medio debido a indicadores de pH, o por halos de degradación de algún componente
en el medio de cultivo.
• Medios deenriquecimiento: Contienen algún componente que permite el
crecimiento de cierto tipo específico de bacteria, pero no contienen sustancias
inhibidoras.
• Medios enriquecidos: Se emplean para cultivar microorganismos que requieren un
gran número de factores de crecimiento. Generalmente contienen extractos
biológicos poco usuales como sangre, suero en polvo, extracto de cerebro de res,
yema de...