Práctica No. 6. SEPARACIÓN EN CAPA FINA DE UNA MEZCLA DE AMINOÁCIDOS.

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ
Práctica No. 6. SEPARACIÓN EN CAPA FINA DE UNA MEZCLA DE AMINOÁCIDOS.
Prerrequisitos
1.Caracteristicas de los aminoaciados naturles en base a su estructura
La gran mayoría de estos aminoácidos naturales poseen el grupo amino en el carbono alfa del acido carboxílico.
Con raras exepciones el carbono alfa lleva también un atomo de hidrogeno. El cuartoenlace del carbono alfa esta unido al grupo que ofrece unas 100 variaciones. Por lo tanto la mayoría de los aminoácidos naturalez difieren únicamente en la mayoría de los aminoácidos naturales difieren únicamente en la naturaleza del resto organico unido al carbono alfa.
Una característica interesante e importante de la química de las proteínas es que todos los aminoácidos de proteínas tienenuna configuración L en el carbono alfa.[1]
2. Fundamento de la reacción de la ninhidrina con los aminoácidos.
La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentraentre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se estabiliza por eso nancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido.
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positivala de ninhidrina, indica que no hay proteinas, pero si hay aminoácidos libres.[2]


Introduccion.
La cromatografía es la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución diferencial entre dos fases, una estacionaria y otra móvil. Hay varios tipos de cromatografía, según la naturaleza de las dos fases involucradas, los compuestos son retenidos en la fase estacionaria poradsorción o partición.

Coeficiente de partición: Las separaciones cromatográficas dependen de la diferencia entre los coeficientes de partición de los componentes entre dos fases inmiscibles. El coeficiente de partición K de una substancia en un sistema de dos fases está dado por: K = cs/cm
Donde:
cs = concentración de la substancia en la fase estacionaria
cm = concentración de la substancia enla fase móvil.

Las dos fases de todo sistema cromatográfico se denominan:
- Fase estacionaria o fase fija: un sólido, un gel, un líquido.
- Fase móvil: un líquido o un gas, que fluye sobre o a través de la fase fija.
La fase móvil, progresa en relación con la otra, la fase estacionaria, y transporta las substancias que se están separando. Se escogen las fases de modo que los coeficientes departición de los componentes de la mezcla sean lo más distintos posible. A mayor coeficiente de partición de una substancia, mayor es su concentración en la fase estacionaria y más lento su avance a lo largo del sistema cromatográfico.

La cromatografía de capa fina, es un tipo de cromatografía donde la fase estacionariaes una capa delgada de un material depositado sobre un soporte, a esteconjunto se le llama placa. La fase móvil es un disolvente o mezcla de disolventes, llamada eluyente, que se mueve por la fase estacionaria por capilaridad. Generalmente, las placas están formadas por una capa de gel de sílice u otro material con propiedades adsorbentes. Adsorción es la capacidad de una sustancia sólida llamada adsorbente, para detener o concentrar selectivamente sobre su superficieinmóvil o estacionaria productos que van en una disolución en movimiento. [3]

Objetivo:

Al termino de esta practica el alumno será capaz de identificar por lo menos dos técnicas de separación de aminoacidos, así como relacionar las caracteríasticas fisicoquímicas de la estructura en función de la técnica de separación. Además describirá las ventajas y desventajas de la tecnica utilizada,...