prácticas biologia

CUADERNO DE PRÁCTICAS

BIOLOGÍA I
GRADO EN CIENCIAS AMBIENTALES

UNED

CURSO 2012-13


Las prácticas de la asignatura Biología I de Ciencias Ambientales constan de dos partes:
1.- Cuatro prácticas presenciales a realizar en el Centro Asociado donde se haya realizado la matrícula o aquel que se le indique al alumno desde su Centro Asociado.
2.- Cuatro prácticas no presenciales, dos delas cuales requieren el uso del ordenador y/o conexión a Internet. El programa informático necesario para realizar estas prácticas así como el artículo a comentar se encontrarán en el curso virtual.

En el presente “Cuaderno de prácticas” deben completarse las prácticas presenciales. Una vez completadas las preguntas que se incluyen en este Cuaderno, debe entregarse al profesor Tutor deprácticas en la fecha que este determine para su calificación como “apto” o “no apto”.

IMPORTANTE: ES OBLIGATORIO TENER LAS PRÁCTICAS COMO “APTAS” PARA SUPERAR LA ASIGNATURA.

PRÁCTICAS PRESENCIALES
ÁCIDOS NUCLEICOS

1.- Describa los fundamentos de la extracción de DNA, indicando la función de cada uno de los componentes del tampón de extracción así como de los pasos del protocolo.
Extraccióndel ADN: sacar los componentes desde un compartimento celular.
Involucra:
– Lisis de las células que contienen a los AN
– Inactivación de nucleasas
– Clarificación: separación de los AN de los restos celulares


1- Cogimos 30 g de guisantes previamente descongelados y añadimos 60 ml de solución de lisis previamente preparada.
2- Batimos a una velocidad máxima durante 15 segundos.
3- Con elbatido resultante , depositamos 15 ml en tres vasos de precipitados con los números 1 ,3,4 previamente marcados.
4- El batido no vertido fue sometido a otro homogeneizado con la batidora de 2 minutos. De esta muestra hemos tomado 15 ml en un vaso de precipitados con el numero 2.
5- Una vez obtenidos los 4 vasos de precipitados pusimos a incubar 15 minutos a 55 grados centígrados los vasosnúmeros 1 , 2 y 4. El numero 3 lo pusimos a incubar 10 minutos a 100 grados centígrados(a ebullición), luego lo dejamos en hielo durante 10 minutos.
6- Después de la incubación filtramos e hicimos una medición para saber cuantos mililitros había en cada vaso:
Fracción 1 : 3.6 ml
Fracción 2 : 3.5 ml
Fracción 3 : 4.1 ml
Fracción 4 : 4.1 ml , a esta fracción añadimos 1 ml de HCI , mezclamos bieny lo dejamos incubando durante 15 minutos a temperatura ambiente.
7- Precipitamos con 2.5 volúmenes de etanol frío a cada fracción.
Fracción 1 : 9 ml de etanol frío
Fracción 2 : 8.75 ml de etanol frío
Fracción 3 : 10.25 ml de etanol frío
Fracción 4 : 12.75 ml de etanol frío














8- Observamos las diferencias en el precipitado del ADN y la capacidad de recuperarlo enforma de ovillos.
Vaso 1 : No se puede hilar


Vaso 2 : No se puede hilar


Vaso 3 : Se enrolla ligeramente


Vaso 4 : No se enrolla pero se hacen grumos.





Siguiendo con la práctica cogimos de la fracción 1 ADN y lo echamos a un tubo de ensayo con 2 ml de agua destilada. Lo revolvimos tapado . Lo denominamos TUBO ORIGEN
De este tubo de ensayo rellenamos 6 tubos de ensayoque contenían 2 ml de agua destilada con estas proporciones:
Tubo 1: 0 gotas de tubo origen 20 gotas de agua destilada
Tubo 2: 1 gotas de tubo origen 19 gotas de agua destilada
Tubo 3: 2 gotas de tubo origen 18 gotas de agua destilada
Tubo 4: 4 gotas de tubo origen 16 gotas de agua destilada
Tubo 5: 8 gotas detubo origen 12 gotas de agua destilada
Tubo 6: Este tubo de ensayo es rellenado por la profesora (muestra problema)

Al carecer de espectrofotómetro de ultravioleta empleamos un método calorímetro donde se mide la absorbancia a 660 nm. En este caso , se realiza una curva patrón con concentraciones conocidas de ADN y se extrapola el resultado obtenido con la muestra problema...