Pr ctica uno y dos bioqu mica 2015






UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NAYARIT

AREA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS AGROPECUARIAS Y PESQUERA

PRÁCTICA UNO

ESCALA COLORIMETRICA DE pH
(Empleando fenolftaleina)

Elaboró
M.C. María Goreti Valdivia Reynoso






DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
El material y equipos que serán utilizados en esta práctica son:
Tubos de ensayo 1.8X15 cm
Potenciómetro
Pipetas de 5 mL graduada
Agua destilada
Vaso deprecipitado de 250 ml
Acido bórico 0.1 M
Gradilla
NaOH 0.1 M
Etiquetas
Fenolftaleina al 1%

Procedimiento

1. Etiquetar los tubos de ensayo del 1 al 9 y colocarlos en una gradilla, agregar a cada uno 5 mL de ácido bórico 0.1 M.

2. Posteriormente adicionar 0.5 mL de NaOH 0.1 M al tubo número 1, al tubo número 2 agregarle 1mL, al tubo número 3 agregarle 1.5 mL y así ir aumentando el volumengradualmente (0.5 mL de NaOH 0.1 M para cada tubo) en orden ascendente, hasta finalmente en el tubo número 9 se haya agregado un volumen de 4.5 mL.

3. Después de esto agregar 4.5 mL de agua destilada al tubo número 1, al tubo número 2 agregarle 4 mL de agua destilada y así sucesivamente hasta haber agregado al tubo número 9 un volumen de 0.5 mL.

4. Enseguida agregar a todos los tubos 3 gotas defenolftaleina.

5. Homogenizar y dejar reposar de 1 a 3 minutos.

6. Anote sus observaciones.

7. Calcular el pH en cada uno de los tubos en base a la siguiente fórmula

Ecuación de Henderson-Hasselbalch

Donde:
[A] = mL de NaOH empleados
[AH] = mL de ácido bórico agregado – mL de NaOH empleados
pKa =9.19





PRÁCTICA No. 2

RECONOCIMIENTOS DE PROTEÍNAS
(COAGULACIÓN DE PROTEÍNAS, REACCIONESXANTOPROTEICAS, REACCIÓN DEL BIURET, REACCIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS AZUFRADOS)

Equipos que serán utilizados en esta práctica
Descripción
Características
Cantidad
Tubos de ensayo
15 X 15 mm
4
Gotero
5 ml.
4
Mechero
Bunsen
1
Vaso de precipitado
Vidrio 500 ml.
1

Reactivos que serán utilizados en esta práctica
Descripción
Características
Cantidad
Clara de huevo
Viscoso
50 ml.
Acido acético concentradoLiquido
50 ml
Ácido nítrico concentrado
Liquido
10 ml
Hidróxido de sodio (20 y 40%)
Lenteja
50 ml
Sulfato cúprico 1%
Polvo oscuro
5 ml
Acetato de plomo 5%
Polvo blanco
10 ml.

Desarrollo de la práctica:
a) Coagulación de proteínas
1.- Colocar en un tubo de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo.
2.- Añadir 5 gotas de ácido acético y calentar el tubo a la flama del mechero.

b) ReacciónXantoproteica
1.- Poner en el tubo de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo
2.- Añadir 1 ml. de ácido nítrico concentrado.
3.- Calentar a baño maría a 100°C.
4.- Enfriar en agua fría
5.- Añadir gota a gota una solución de sosa al 40%




c) Reacción del Biuret
1.- Tomar un tubo de ensayo y colocar una pequeña cantidad de albumina de huevo
2.- Añadir 2 ml. de solución de hidróxido desodio al 20%.
3.- A continuación de 4 a 5 gotas de solución de sulfato cúprico al 1%
4.- Debe aparecer una coloración violeta-rosácea característica.

d) Reacción de los aminoácidos azufrados
1.- Poner en el tubo de ensayo una pequeña cantidad de albumina de huevo.
2.- Añadir 2 ml. de solución de hidróxido de sodio al 20%.
3.- Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.
4.- Calentar eltubo hasta ebullición.
5.- Si se torna un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo. Utilizándose el azufre de los aminoácidos lo que nos sirve para identificar proteínas que tienen en su composición aminoácidos con azufre.






























PRÁCTICA No. 2

RECONOCIMIENTOS DE PROTEÍNAS
(COAGULACIÓN DE PROTEÍNAS, REACCIONES XANTOPROTEICAS, REACCIÓN DELBIURET, REACCIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS AZUFRADOS)

Equipos que serán utilizados en esta práctica
Descripción
Características
Cantidad
Tubos de ensayo
15 X 15 mm
4
Gotero
5 ml.
4
Mechero
Bunsen
1
Vaso de precipitado
Vidrio 500 ml.
1

Reactivos que serán utilizados en esta práctica
Descripción
Características
Cantidad
Clara de huevo
Viscoso
50 ml.
Acido acético concentrado
Liquido
50 ml
Ácido nítrico...