Pr ctica N 1

PRÁCTICA Nº 1

DILUCIONES Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

I.- PROPOSITO DE LA PRÁCTICA

Al finalizar la práctica el estudiante deberá estar en capacidad de:

a) Preparar diluciones realizando los respectivos cálculos matemáticos y utilizando adecuadamente las pipetas necesarias para este fin.
b) Comparar la acidez y basicidad de diversas soluciones a través delcomportamiento de un pigmento vegetal (antocianina) que actúa como un
indicador natural.


II.- INTRODUCCIÓN

a) DILUCIONES

Una dilución consiste en aumentar la cantidad de disolvente de una disolución.
En el laboratorio, en muchas ocasiones es necesario diluir las muestras o los reactivos para obtener concentraciones adecuadas a las técnicas. La perfecta preparación de estasdiluciones en imprescindible para la obtención de resultados correctos y requiere un uso adecuado del material volumétrico (Ver Anexo sobre “Material Volumétrico” al final de esta guía de prácticas).

La dilución realizada se expresa generalmente como una unidad de la solución inicial por unidades de la solución final. Por ejemplo, una dilución al 1/10 requiere que una cantidad de lasolución inicial sea o haya sido diluida hasta un volumen de 10 unidades.

Aquellas concentraciones en las cuales se expresa la concentración como cantidad de soluto en un volumen fijo de disolución, como es el caso de la Normalidad, Molaridad o % p/v, se denominan escalas volumétricas de concentración.

Cuando la concentración se expresa sobre una de estas escalas volumétricas, la cantidadde soluto contenido en un volumen dado de solución es igual al producto del volumen por la concentración:

Cantidad de soluto = Volumen . Concentración

Si se diluye una solución, el volumen de la misma aumentará a la par que disminuye su concentración, mientras que la cantidad de soluto presente permanecerá constante. Por ello, dos soluciones con distintas concentraciones, pero quecontienen las mismas cantidades de soluto, están relacionadas de la siguiente forma:

V1 . C1 = V2 . C2


Si se conocen tres de los términos de esta ecuación, se puede calcular el cuarto. Las cantidades a los dos lados de la ecuación deben expresarse en las mismas unidades.


DILUCIONES SERIADAS

En el Laboratorio de Bioanálisis, principalmente en el área de Inmunología, es frecuente lautilización de diluciones seriadas, que se llaman así porque después de la primera todas son iguales.

Ejemplo: Diluir un suero al 1:2 por adición de 1 ml de suero a 1 ml de solución salina. Tubo (1).




1 ml 1 ml 1 ml 1 ml






Tubo 1Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5

1 ml de suero
1 ml de sción salina Cada uno contiene 1 ml de solución salina


Dilución final: 1 : 2 1 : 4 1 : 8 1 : 16 1 : 32
(luego de transferir)

Respuesta: A partir del Tubo (1) se preparan cuatrotubos más (tubos 2, 3, 4 y 5) que contienen cada uno 1 ml de solución salina como diluyente. Se realiza la dilución seriada por transferencia de 1 ml del Tubo (1) al Tubo (2), luego se debe mezclar y transferir 1 ml del Tubo (2) al Tubo (3), y así sucesivamente hasta el Tubo (5).
La concentración del suero decrece según un factor 2 en cada dilución.


b) SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

En losorganismos vivientes el pH debe permanecer en límites fijos, los cuales difieren según la especie, el órgano, la célula o aun la partícula subcelular considerada. Para mantener el pH en el valor fisiológico, el organismo dispone de sistemas llamados “tampones” (buffers) o amortiguadores. Se llama tampones a las sales de ácido débil y de base fuerte en equilibrio con su ácido débil. Cuando una...