PRÁCTICA DE LABORATORIO ENZIMAS

PRÁCTICA DE LABORATORIO
ENZIMAS
Laura Villegas Jaramillo
0023590036
Grado 11 – Diploma

Cantidad de O2 liberado a distintas cantidades de sustrato
Marco teórico:
El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos vivos, pero dado a que este es potencialmente toxico, es transformado enseguida por la enzima catalasa. La catalasa es una enzima que sepuede encontrar en muchos organismos, que ayuda a su supervivencia ya que cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxigeno, para que este no sea tóxico.
También, esta enzima cumple una función de protección contra microorganismos patógenos anaeróbicos, ya que estos mueren al estar en contacto con oxigeno, y es por esta razón que el oxigeno liberado por estaenzima tiene un efecto bactericida sobre dichos microorganismos. La catalasa es de suma importancia en los seres vivos, tanto así, que en la ausencia de ésta enzima por defectos genéticos, condición conocida como acatalasemia, causa notables infecciones en la mucosa bucal en los humanos, hasta llegar a causar la perdida de dientes y lesiones graves en los tejidos de la boca.

La presencia de la enzimacatalasa en los tejidos de los organismos, se puede demostrar en el experimento de laboratorio a realizar, en donde se expondrán tejidos de un hígado de pollo con peróxido de hidrógeno y se observará la reacción y el efecto de esta enzima en dicho encuentro.

Objetivo:
Medir la cantidad de oxigeno liberado en la reacción de la enzima catalasa en los tejidos de un hígado de pollo de acuerdo conla cantidad de sustrato.

Variables:
Dependiente: Cantidad O2 en porcentaje liberado en la reacción.
Independiente: Cantidad de sustrato ( hígado de pollo).
Controladas: Cantidad de peróxido de hidrógeno añadido a la reacción (20ml).
Precauciones: Al trabajar con un sustrato de hígado de pollo, es importante usar guantes y tapabocas para evitar malestares por el olor de el hígado, también, esimportante tener precaución al cortar los trozos de sustrato con el bisturí.


Materiales:
- Hígado de pollo , en total 11 g . (3g, 2.5g, 2g , 1.5g, 1g, 0.5g) - 3 Beakers de 50 mL - 6 Vidrios de reloj - 3 goteros - 1 vara agitadora -1 balanza eléctrica - Peróxido de hidrógeno al 5% ( 120 mL) – Pinzas – bisturí

Método de procedimiento:
1. Se cortan 6 trozos de hígado de pollo, cada uno de masa;0.5g, 1g, 1.5g, 2g, 2.5g y 3g respectivamente y se ponen en 6 vidrios de reloj.
2. Se miden 6 porciones de 20 ml de peróxido de hidrógeno en los beakers de 50 ml.

3. Al tener todos los materiales preparados, se empieza el análisis de las muestras, primero se ponen en el tubo de el aparato LabQuest medidor de oxigeno, la primera muestra de 0,5g de sustrato (hígado de pollo) y se le añaden 20 mlde peróxido de hidrógeno, se tapa con el tubo medidor de oxigeno y se registra la cantidad de oxigeno liberado cada 20 segundos durante 300 segundos. Se repite este procedimiento para las distintas cantidades de sustrato (0.5g, 1g, 1.5g, 2g, 2.5g y 3g), cada prueba se repite 3 veces para tener resultados de datos mas asertivos.

4. Una vez realizadas las pruebas, se analizan los datos y se escogenlos datos del rango de 100 hasta 280 segundos para ser analizados.









Recolección de datos brutos:


0.5 g DE SUSTRATO (HIGADO)
Oxigeno liberado en %.
1 g DE SUSTRATO (HIGADO)
Oxigeno liberado en %.
1.5 g DE SUSTRATO (HIGADO)
Oxigeno liberado en %.
Seg
Trail
1
Trail
2
Trail 3
Trail
1
Trail
2
Trail 3
Trail
1
Trail
2
Trail 3
100
15,67
15,64
15,70
17,44
17,47
17,50
18,50
18,52
18,49120
16,07
16,10
16,12
17,98
18,00
18,02
19,40
19,43
19,41
140
16,34
16,36
16,39
18,56
18,59
18,61
20,39
20,40
20,42
160
16,59
16,60
16,57
19,14
19,16
19,19
22,10
22,12
22,14
180
16,89
16,87
16,85
19,62
19,66
19,61
23,62
23,66
23,68
200
17,15
17,15
17,20
20,37
20,38
20,40
25,11
25,10
25,13
220
17,44
17,42
17,46
21,12
21,15
21,18
26,56
26,59
26,60
240
17,85
17,89
17,90
21,81
21,83
21,87
28,02
28,00...