PRA CTICA No 13 PROTEI NAS 2015

 

 
PRÁCTICA
 No.
 13
 REACCIONES
 DE
 IDENTIFICACIÓN
 DE
 AMINOÁCIDOS
 Y
 PROTEÍNAS
 
-­‐
 Pruebas
 colorimétricas,
 de
 coagulación
 y
 precipitación
 para
 la
 identificación
 de
 a.a.
 y
 proteínas.
 

 

 

 
FUNDAMENTO
 
Las
  proteínas
  son
  sustancias
  químicas
  orgánicas
  de
  alto
  peso
  molecular,  constituida
  por
  muchos
 
aminoácidos,
 que
 juegan
 un
 papel
 muy
 importante
 en
 la
 estructura
 y
 dinámica
 de
 la
 materia
 viva.
 
Solamente
  20
  aminoácidos
  diferentes
  se
  encuentran
  formando
  parte
  de
 las
  proteínas;
  sin
  embargo,
 
no
 todas
 las
 proteínas
 contienen
 los
 20 aminoácidos.
 En
 esta
 práctica
 vamos
 a
 realizar
 reacciones
 
cualitativas
  de
  coloración,
  que
  nos
  permitirán
  detectar,
  la
  presencia
  de
  grupos
  químicos
  en
 
aminoácidos
 y
 proteínas.
 

 
La
 siguiente
 figura
 muestra
 la
 estructura
 química
 de
 un
 aminoácido
 así
 como
 el
 enlace
 peptídico
 y 
generalidades
 de
 las
 proteínas.
 


 
 
 
 
 
 


 

 
Los
  aminoácidos
  y
  proteínas
  llevan
  a
  cabo
  reacciones:
  coloridas,
  de
  coagulación
  y
 
  precipitación
 
para
 su
 identificación.
 


 
 
 
 
 
 
 
 

MANUAL DE PRÁCTICAS DE Q.ORGÁNICA I
M.C.F. Teresita Guadarrama Salgado


 

 

 

 PRUEBA
 DE
 LA
 NINHIDRINA
 (Hidrato
 de
 tricetohidrindeno)
 

 
Esta
  es
  una
  reacción
  general
  para
  cualquier
  aminoácido
  y
  es
  debido
  a
  la
  presencia
  del
  grupo
  amino
 
(NH2),
 de
 manera
 de
 que
 todos
 los
 alfa
 aminoácidos
 y
 por
 supuesto
 las
 proteínas
 dan
 positiva
 a
 esta
 reacción.
  No
  obstante,
  cualquier
  sustancia
  proteica
  que
  contenga
  un
  grupo
  alfa-­‐NH2
  también
  de
 
positiva
 a
 esta
 reacción,
 la
 reacción
 se
 efectúa
 en
 tres
 etapas.
 
1.Reducción
 de
 la
 ninhidrina
 oxidada
 por
 la
 acción
 del
 alfa
 aminoácido
 
2.Hidrólisis
  del
  Aminoácido
 producido
  para
  formar
  un
  alfa
  cetoácido,
  el
  cual
  se
  carboxila
  bajo
  las
 
condiciones
 de
 la
 reacción.
 
3.
  Finalmente,
  el
  Amoniaco
  (NH3)reducido
  reacciona
  con
  cantidades
  equimolares
  de
  ninhidrina
 
oxidada
  y
  ninhidrina
  reducida
  para
  formar
  un
  compuesto
  de
  color
  azul
 violeta,
  la
  intensidad
  del
 
color
 es
 proporcionada
 a
 la
 cantidad
 de
 aminoácidos
 presentes.
 
Esta
  reacción
  se
  desarrolla
  mejor
  a
  pH
  neutro.
  Todos
  los
  aminoácidos
  dan
  color
  azul
  violeta,
  con
 
excepción
 de
 prolina
 e
 hidroxiprolina
 que
 da
 color
 amarillo.
 

 
PRUEBA DE
 BIURET
 
 
Esta
 reacción
 es
 característica
 para
 aquellos
 compuestos
 que
 poseen
 dos
 o
 más
 enlaces
 peptídicos.
 
La
 denominación
 “Biuret”
 se
 debe
 a
 que
 el
 compuesto
 orgánico
 Biuret
 también
 da
 positiva
 a
 esta
 
reacción.
 La
 reacción
 de
 Biuret
 se
 basa
 en
 las
 formaciones
 en medio
 alcalino,
 de
 un
 complejo
 de
 
coordinación
 de
 color
 violeta
 entre
 el
 ión
 cúprico
 (Cu+2)
 y
 4
 átomos
 de
 nitrógeno,
 provenientes
 de
 
las
 cadenas
 peptídicas.
 

 
PRUEBA
 XANTOPROTÉICA
 
Con
  esta
  reacción
  podemos
  identificar
  la
  presencia
  de
  los
  aminoácidos
  aromáticos
 ...