Prac Micro

Método para la determinación de bacterias coliformes, coliformes fecales
y Escherichia coli por la técnica de diluciones en tubo múltiple (número
más probable o NMP)
OBJETIVOS
 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos mediante la búsq ueda de
microorganismos coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli.
 Diferenciar los organismos coliformes totales de losmicroorganismos coliformes fecales.
 Organizar e interpretar los resultados.

GENERALIDADES
Debido a que un gran número de enfermedades son transmitidas por vía fecal-oral utilizando
como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con microorganismos que
funcionen como indicador de contaminación fecal. Estos deben de ser constantes,
abundantes y exclusivos de la materia fecal,deben tener una sobrevivencia similar a la de
los patógenos intestinales y deben ser capaces de desarrollarse extraintestinalmente.
El grupo coliforme constituyen un grupo heterogéneo con hábitat primordialmente intestinal
para la mayoría de las especies que involucra, es constante, abundante y casi exclusivo de la
materia fecal, su capacidad de sobrevivencia y multiplicación fuera delintestino también se
observan en aguas potables, por lo que este grupo se utiliza como indicador de
contaminación fecal en agua; encontrandose que mientras mayor sea el número de
coliformes en agua, mayor será la probabilidad de estar frente a una contaminación reciente.
Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se multipl ican, por
lo que en los alimentos el grupocoliforme adquiere un significado distinto al que recibe en el
agua.
Cuando los productos alimenticios
han recibido un tratamiento térmico
(pasteurización, horneado, cocción, etc.), estos microorganismos se util izan como
indicadores de malas prácticas sanitarias.
Para su estudio, se dividen en dos grupos. El grupo de bacterias coliformes totales el cual
comprende a todos los bacilosGram-negativos aerobios o anaerobios facultativos, no
esporulados, que fermentan la lactosa con producción de gas en un lapso máximo de 48 h. a
35°C ± 1ºC. Este grupo está conformado por 4 géneros principalmente: Enterobacter,
Escherichia, Citrobacter y Klebsiella.
El grupo de coliformes fecales, está constituido por bacterias Gram-negativas capaces de
fermentar la lactosa con producción de gas alas 48 h de incubación a 44.5 ± 0.1°C. Este
grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la más prominente es Escherichia
coli.
La demostración y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse mediante el
empleo de medios de cultivo líquidos y sólidos con características selectivas y diferenciales.

Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentraclasificado dentro de la
familia Enterobacteriaceae (bacterias entéricas), existe como comensal en el intestino
delgado de humanos y animales. Sin embargo, existen algunas cepas de E. coli patógenas
que provocan enfermedades diarreicas. Estas se clasifican con base en las características
que presentan sus factores de virulencia únicos, cada grupo provoca enfermedad mediante
un mecanismo diferente. Sesabe que sus propiedades de adherencia a las células
epiteliales de los intestinos grueso y delgado son codificadas por genes situados en
plásmidos. De manera similar las toxinas son mediadas por plásmidos o fagos.
Este grupo de bacterias se encuentra constituido por las siguientes cepas : E. coli
enterotoxigénica (ETEC), E. coli enteropatógena (EPEC), E. coli enterohemorrágica (EHEC),
E. colienteroinvasiva (EIEC), E. coli enteroagregativa (EAEC) y E. coli enteroadherente
difusa (DAEC). Existen otras cepas que no han sido perfectamente caracterizadas; de las
cepas anteriores, las 4 primeras están implicadas en intoxicaciones causadas por el
consumo de agua y alimentos contaminados.
Escherichia coli enterotoxigénica ETEC es reconocida como el agente causal de la diarrea
del...