Prac. Microbiologia


Número de Práctica
Nombre de la Practica
Duración
8
Recuento en placa de productos lácteos
2 hrs

Objetivo:
Realizar el procedimiento adecuado para recuento de microorganismos mesofílico en placa.
Equipo, material y reactivos necesarios



Reactivos
Caldo peptona
Agar cuenta estándar
Cristal violeta
Lugol
Alcohol-acetona
Safranina
Aceite de inmersión
Leche bronca.

Materiales
Mechero
TripieTela de asbesto
3 matraz Erlenmeyer
1 agitador
1 pipeta
1 gradilla
4 tubos de 16 x 50
Pipetor automático 1ml
2 portaobjetos
1 varilla de tinción
1 Microscopio
1 asa bacteriológica



Desarrollo de la Práctica

Paso I. Preparación de los medios de cultivo

a) Realizar los cálculos pertinentes y preparar 90 ml de peptona (esterilizar en el mismo matraz de preparación)
b) Realizar los cálculospertinentes y preparar 50 ml de peptona (transferir 9 ml a cada uno de los tubos de ensaye, tapar con tapón de rosca y esterilizar.
c) Realizar los cálculos pertinentes y preparar 80 ml de agar cuenta estándar ( esterilizar en el matraz de preparación).

Paso II. Preparación de las diluciones

a) Homogenizar la muestra manualmente
b)Tomar 10 ml de la muestra y trasferir bajo condiciones de esterilidadal matraz que contiene 90 ml de peptona mezclando cuidadosamente (dilución 10-1)
c) De la dilución del paso B transferir bajo condiciones de esterilida 1ml al primer tubo y mezclar, repetir el procedimiento con los demás tubos se obtendrán las diluciones de 10-2, 10-3, 10-4 y 10-5.



Paso III. Vaciado en placa

a) Rotular 5 cajas de cultivo, anotando en cada una un tipo de dilución.
b) Vaciaren ellas agar cuenta estándar y dejar solidificar.
c) Adicione en cada caja 1ml. De la dilución según corresponda.
d) Con ayuda de un tubo en forma de palo de hokey estéril, distribuir el inoculo perfectamente.
e) Incubar a 37°C por 24 hrs.

Paso IV Reporte resultados.

a)Realice la cuenta de colonias presentes en cada una de las cajas y reporte número de colonias por dilución.


Dilución
Número decolonias












b) Seleccione una colonia característica, realice un frote y tiña por el método de GRAM

















Cuestionario


1. Mencione los principales microorganismos patógenos que podemos encontrar en la leche.
2. ¿Qué método se utiliza para la eliminación de microorganismos de la leche?
3. ¿Cuál es el nombre y objetivo de la NOM-092-SSA1-1994?



Número de Práctica
Nombre dela Practica
Duración
9
Análisis de Harina
2 hrs

Objetivo:
El alumno valorara una serie de características fisicoquímicas de una muestra de harina.
Equipo, material y reactivos necesarios



Reactivos
NaOH 0.05 N
Fenolftaleína
Agua destilada


Materiales
Bureta
Soporte Universal
Pinza para bureta
2 Matraces Erlenmeyer
2 Vasos de precipitados
1 tripie
1 mechero
1 capsula de porcelana
Pinza paracrisol
Pipeta
Probeta
Vidrio de reloj
Baño maria
Embudo
Agitador
potenciometro



Desarrollo de la Práctica

Paso I. Extracción de gluten

a) Pesar 20 g de harina y colocar en un vaso de precipitado
b) Adicionar 15 ml de agua y mezclar hasta que se produzca un amasijo suave
c) Dejar reposar dentro de un vaso con agua por 10 min.
d) Amasar suavmente bajo un chorro de agua ligero hasta eliminar todo elalmidón (hasta que el agua de lavado salga clara)
e) El residuo formado de gluten húmedo se exprime con los dedos y luego se pesa (reportar como % de gluten húmedo)
f) Endurecer un trozo de papel filtro previamente pesado y extender el gluten como una capa delgada en el papel y secarlo en el horno de calor seco.
g) Cuando el peso es casi constante, el resultado se reporta como % de gluten seco.Paso II. Acidez por extracción de agua

a) Mezclese 28 g de harina con 200 ml de agua libre de dióxido de carbono (destilada) en un matraz y llévese a baño maría a 40°C por una hora con el matraz tapado (con vidrio de reloj).
b) Filtrar y titular 100 ml del filtrado con la solución de NaOH 0.05 N usando como indicador fenolftaleína.
c) La ácidez del extracto acuoso se calcula como ácido láctico...