pract 1 Bioquimica lowry

REVISIÓN DE MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS Y ELABORACIÓN DE CURVA ESTÁNDAR DE PROTEÍNA.

Resumen
Existen diferentes métodos para conocer la concentración de una proteína, varios métodos como: losespectroscópicos, de Lowry, de Biuret, etc. Realizara una curva de calibración con el método de Lowry. Se obtuvo una curva de calibración congruente a la tonalidad azul y a las concentraciones de laproteína.

Introducción
MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS DE ANÁLISIS
Se basan en la medición de la radiación electromagnética emitida o absorbida por la materia.
Emisión: utilizan la radiación emitida por unasustancia que ha sido excitada por una energía térmica, eléctrica o electromagnética, al pasar al estado fundamental. Esta radiación es característica del material o compuesto emisor.
Absorción: se basanen la disminución de potencia de una radiación electromagnética que ha interaccionado con la materia.
Tipos:
Biuret. Es una reacción coloreada(violeta) debido a la formación del complejo Cu en unmedio alcalino con compuestos que poseen grupos –CO –NH
Lowry. Es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de las proteínas. A la muestra se añade un reactivo que forma un complejo coloreadocon las proteínas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentración de proteínas, según la ley de Lambert-Beer A= ε.l.c
Este método consta de dos etapas: 1) Los iones Cu2+, en medioalcalino, se unen a las proteínas formando complejos con los átomos de nitrógeno de los enlaces peptídicos. Estos complejos Cu2+-proteína tienen un color azul claro. Además, provocan el desdoblamiento dela estructura tridimensional de la proteína, exponiéndose los residuos fenólicos de tirosina que van a participar en la segunda etapa de la reacción. El Cu2+ se mantiene en solución alcalina en formade su complejo con tartrato.
2) La reducción, también en medio básico, del reactivo de Folin-Ciocalteau, por los grupos fenólicos de los residuos de tirosina, presentes en la mayoría de las...