practica 1 bioquimica

“UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO
DE HIDALGO”

INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD

AREA ACADEMICA DE NUTRICION

3°2

BIOQUIMICA II

EQUIPO 5 INTEGRANTES:
FLORES OLALDE ITZEL
BALDERRAMA RAMIREZ CESAR
JIMENEZ MENDOZA IVONNE
PEREZ PALAFOX NANCY ARELY

PRÁCTICA NUMERO 1

CATEDRATICO: ARACELY ORTIZ POLO

Práctica numero 1
ESTUDIO DEL BOMBEO DE PROTONES POR LEVADURAS; EFECTO DELOS INHIBIDORES DE LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES Y DE LOS DESACOMPLANTES

Marco teórico:
Una bomba de protones son complejos enzimáticos integrales de membrana que es capaz de movilizar protones a través de la membrana de una célula, de la mitocondria o de cualquier otro compartimento subcelular.
En la respiración celular, las bombas de protones, localizadas en la membrana interna de lamitocorndria, secuestran protones de la matriz mitocondrial y los transloca al espacio intermembrana. Este trasporte de protones, que está acoplado a una corriente de electrones, crea una diferencia de gradiente tanto en pH como en carga eléctrica y establece un potencial electroquímico que actúa como una batería o reservorio de energía para la célula. Debido a que el bombeo de protones serealiza contra gradiente supone un gasto de energía que es proporcionada por el flujo de electrones de la cadena respiratoria.
La membrana mitocondrial interna funciona, pues, de manera similar a un dique en un río, bloqueando el flujo de protones hacia la matriz; los protones solo pueden regresar a la matriz a través de las ATP sintasas; lo hacen a favor de gradiente y ello genera energía en forma deATP.
Dinitrofenol: es un acido débil que capta un protón del espacio intermembrana que tiene una alta concentración de protones y los transporta a través de la membrana hacia la matriz en donde el protón se disocia debido a la baja concentración de protones allí existente.

Accion del desacoplador Dinitrofenol, un ionosforo de proton que equilibra el
pH a travez de la membrana mitrocondrialinterna


Azida de Sodio: Las azidas afectan la cadena respiratoria de una forma muy similar al cianuro, inhibiendo a los grupos Hem de los citocromos de la Citocromo Oxidasa (complejo IV). Las azidas pueden formar compuestos con enlaces covalentes e iónicos con los metales. La azida de sodio, NaN3, es una sal que generalmente se emplea como generador de gas nitrógeno en la fabricación deairbags.
La forma aniónica de la azida es tóxica, es capaz de inhibir a la enzima citocromo c oxidasa formando un enlace irreversible con el cofactor hemo, en un proceso similar al realizado por el monóxido de carbono. Las sales de la azida son empleadas generalmente en bioquímica como elementos de mutagénesis.
OBJETIVO
1.- Que el alumno relacione el consumo de glucosa con los cambios de pHproducidos por las levaduras.
2.- Que el alumno describa las vías por las cuales la glucosa genera los cambios de pH.
3.- Que el alumno interprete el efecto de los inhibidores y los desacoplantes sobre la salida de protones.

MATERIAL
3 Vasos de precipitado de 100 ML
2 Pipeta graduada de 5 ML
2 Pipeta graduada de 10 ML
1 Perilla para pipeta
1 Probeta graduada de 50 ML
1 Barrita Magnética
1Piceta.
EQUIPO
Potenciómetro
Parrilla de calentamiento con agitación
REACTIVOS
15 ml Levadura (Saccaromices Cerevisiae) 200 mg/ml
5 ml Glucosa de 10%
0.2 ml Dinitrofenol 40Mmol/L en etanol
0.5 ml Azida de sodio 400 Mmol/L

RESULTADOS:
TIEMPO
CONTROL
DNT
AZIDA DE SODIO
Inicio
9.54
4.63
7.28
3 minutos
5.71
8.44
7.98
3 minutos
10.28
4.30
8.71
glucosa
9.12
4.26
8.31
5minutos
10.21
4.32
8.60
5 minutos
10.72
4.69
8.38
10 minutos
6.10
4.32
8.24



CUESTIONARIO:
1. ¿Cuales son las fuentes de carbono que usa la levadura?
Los hidratos de Carbono, aminoácidos, además de algunas vitaminas y alguna acción por parte del nitrógeno.
2. ¿Cuáles son las vías metabólicas que catabolizan a los carbohidratos?
La glucolisis, la fosforilacion oxidativa, ciclo de...