PRACTICA 1 con analisis copia

UNIVERSIDAD NACIONAL DE ASUNCION
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA














* TECNICA DE COLORACION

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San Lorenzo – Ciudad Universitaria – Paraguay

Año 2.013

*Práctica Nº1, presentada en la Cátedra de Biología del Desarrollo
**Alumno de la carrera de Biología
Profesor de la Cátedra:INTRODUCCIÓN


Las células y tejidos son examinados por transparencia con todos los tipos de microscopios, lo que obliga a estudiar las células aplanadas o láminas tisulares lo suficientemente delgadas como para que puedan ser atravesadas por la radiación luminosa. Esto implica una serie de de procedimientos: la fijación es el primer paso, esencialmente es un método para lapreservación de la morfología y la composición de química de la célula y los tejidos, consiste en matar a las células, de manera tal que las estructuras que poseían éstas en el estado viviente se conserven con un mínimo de artificios a lo largo del tiempo y durante los procedimientos posteriores; el segundo paso es la deshidratación en alcoholes, trasferidos a un solvente intermediario o agente aclarantecomo el benceno o el tolueno (ya que el alcohol no es miscible en los agentes de inclusión); el tercer paso es la inclusión de las células o tejidos en un agente que endurece la muestra que culminan con la obtención de un fino corte transparente del tejido.
La obtención de cortes delgados y transparentes, la falta de colores y contrastes en algunas estructuras celulares no permite casi visualizarcasi ningún componente por eso tenemos las técnicas de coloración que se efectúan con dos propósitos. En un caso se trata de posibilitar el estudio morfológico o estructural, sin que se pueda obtener mayor información sobre la naturaleza químicas de las estructuras observadas. En el otro se utilizan métodos tendientes a identificar un determinado tipo de molécula o sustancia.
La mayoría de loscolorantes son de naturaleza orgánica y aromática. Se reconocen dos tipos de colorantes: los básicos el grupo cromóforo, el que imparte el color, es básico (catiónico), por ejemplo el azul de metileno, es el clorhidrato de tetrametiltionina, cuya parte acida es incolora; y los ácidos que contiene los grupos nitrito (-NO2) y el quinoide, los grupos cromóforos contiene el radical azo (-N=N) y elandamio (-N=) (De Robertis, 2005).




















Objetivos

Identificar y diferenciar el aspecto que presentan las estructuras celulares por diferentes métodos de tinción.
Interpretar fundamento químico de las técnicas histoquímicas

Metodología

Se observaron las láminas histológicas y citológicas teñidas con las técnicas abajo citadas. Se observó al microscopio y se identificaron el núcleoy el citoplasma según la coloración. Luego se describió el aspecto de las células y se indicó las estructuras basófilas y acidófilas.
Preparaciones Fijadas
1. Tinción Hematoxilina y Eosina: con esta técnica núcleos, erganoplasma y ciertos gránulos secretorios colorean de un color azul-violáceo. Citoplasma, fibras conectivas y sustancias intercelulares de rosado-anaranjado.
2. Tinción Argéntica:sirve para distinguir los nucléolos dentro del núcleo celular, por una alta impregnación de plata positiva que les da una tonalidad parda oscura casi negra mientras que el núcleo toma un color ocre débil y más leve es aun la tonalidad del citoplasma.
3. Tinción diferencial de GRAM: Los microorganismos Gram (+) toman una coloración lila, mientras que el resto de las estructuras toman el color dela coloración de contraste que puede ser rosado o anaranjado.

Técnicas citohistoquímicas

4. Coloración de Feulgen: Los núcleos aparecen teñidos de rojo fucsia, mientras el citoplasma queda sin color
5. Giemsa:




















Descripción de los resultados
Figura 1: Tinción de Feulgen. Células Vegetales
Se observo la célula con un aumento de 1000x. Se distinguieron 18 cromosomas...