practica 1
5.01.- MEDICION DE TUBOS EN BALANZA ANALITICA PARA OBTENCION DE PESOS EXACTOS UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA
5.2.13 ELABORACION DE GEL
50 ML == 1.51
TAE 1x ¿?
C1V1=C2V2 = 1.5%*50/50=0.01*1000= 10 ML DE BUFFER + 490 DE AGUA PARA SU PREPARACION
C1V1=C2V2 = 50 ML*1.5%/100 = 0.75 GRAMOS/MOL DE AGAROSA5.2.15 DE LOS SIGUENTES DATOS SE HACE UNA MULTIPLICACION POR 7 PARA OBTENER LA REACCION DEL TAE
3.2
6.- RESULTADOS OBTENIDOS
6.1.- Como resultado de la práctica se logró el objetivo de lograr la práctica ya que el gel permitió el corrimiento del ADN que obtuvimos de la muestra mediante la utilización un gel de agarosa, un polisacárido que gelifica espontáneamente a temperaturaambiente, hay que visualizando el resultado. En el caso del ADN, existen moléculas fluorescentes que se intercalan en los surcos de la molécula de ADN. Si sumergimos el gel en una solución que tenga estas moléculas, éstas se unirán al ADN.
7.-ANALISIS DE RESULTADOS
7.1 Aplicación en nuestra carrera.- Puede ser según su utilización dentro del área laboral dependiendo de lo que se quiera obtener obuscar según su código genético, Como por ejemplo algunas aplicaciones que podemos tener son con fines:
Tóxicos
Bioquímicos
Diagnostico Microbiologico
Interacción Biológica
Obtención de Macromoléculas
Procesos ecológicos-evolutivos
Distinción de plantas e individuos
Dinámicas Microbianas
Relación Filogénica
Diagnostico Biomolecular
Utilización Química
7.2 Análisis y discusión.- Para conocer lacantidad y calidad del ADN por espectrofotometría, es importante conocer si el ADN obtenido está integro en el medio que obtuvimos fue integra ya que se pudo observar en la electroforesis las bandas. La integridad del ADN se puede observar mediante electroforesis en gel de agarosa. Si el ADN está integro, se debe observar una banda estrecha cercana al pozo en que se colocó la mezcla de ADN. Si estáfragmentado, se observará una banda de más de un cm de ancho o un sendero luminoso en el carril de la muestra. El ADN fragmentado dificulta la amplificación de productos de PCR de alto peso molecular y afecto la reproducibilidad de las técnicas.
7.3 Componentes del PCR,. La DNasa I es una endonucleasa que genera rupturas no específicas en el ADN para liberar di-, tri- y oligonucleótidos fosforiladoscon extremos terminales 5’-fosforilados y 3’-hidroxilados. Actúa sobre hebras de ADN simple y doble, cromatina e híbridos de ARN:ADN. En laboratorio se utiliza principalmente en la degradación del ADN molde en las reacciones de transcripción y eliminación de contaminación de ADN genómico de muestras de ARN [1].
Una desoxirribonucleasa (DNasa, para abreviar) es cualquier enzima que cataliza larotura hidrolítica de los vínculos fosfodiéster en el ADN de red troncal, por tanto, son un tipo de nucleasa. Son conocidas una amplia variedad de desoxirribonucleasas, que difieren en las especificidades de su sustrato, mecanismos químicos y funciones biológicas [2].
Algunas DNasas cortan residuos sólo en los extremos de las moléculas de ADN (exo-deoxiribonucleasa, un tipo de exonucleasa). Otroscortan en cualquier punto de la cadena (endo-deoxiribonucleasas, un subconjunto de endonucleasas). Algunas son bastante indiscriminadas sobre la secuencia de ADN que corta, mientras que otros, incluyendo las enzimas de restricción, son para secuencias muy específicas. Algunos cortan sólo ADN de hebra doble, otros son específicos para las moléculas de cadena simple, y otros más activos hacia ambos[2].Tipos de desoxirribonucleasas Los dos tipos principales de DNasa en metazoos se conocen como desoxirribonucleasa I y desoxirribonucleasa II. Otros tipos de DNasa incluye la micrococo nucleasa .
El concepto de baño María implica el calentamiento indirecto de la sustancia por convección térmica desde el medio líquido (agua, frecuentemente).
Para calentar al baño María hay que introducir un...
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