Practica 2 Bioquímica
Páginas: 3 (690 palabras)
Publicado: 13 de febrero de 2013
1. Investigue bibliográficamente como se lleva a cabo el mecanismo de reacción de la catalasa.
Mahler y Cordes. Páginas: 591-592.
La catalasa (Peróxido de hidrogeno: peróxido de hidrogenooxidoreductasa) es una enzima con un grupo hemo, cuya función es la destrucción del peróxido de hidrogeno, producto de varias oxidaciones biológicas. La descomposición del peróxido de hidrogeno se puedeconsiderar como la oxidación de una molécula por otra. La reacción es:
-------->
2H2O2 CATALASA O2 + 2 H2O
Puede utilizar como sustrato además del peróxido dehidrogeno, alquilos de peróxido de hidrogeno, etanol y ácido nitroso. El mecanismo de reacción es a través de la formación de un complejo catalasa – peróxido de hidrogeno. En los peroxisomas se encuentrangrandes cantidades de catalasa. En estos orgánulos, se generan grandes cantidades de H2O2, por lo que es necesaria la acción de la catalasa para convertirlo en agua.
2. Investigue bibliográficamentecomo puede hacerse un aislamiento, purificación y cristalización de la catalasa a partir del hígado, sangre, bacterias, o plantas.
Methods in Enzymology II. Páginas: 775-781, 781-784, 784-789,789-791.
Por método de: BACTERIAS
Se realiza una inoculación de estafilococos en un caldo cerebro corazón y se incuba durante 24 horas aproximadamente a 37°C. Posteriormente las cajas de agar 110 sesiembran masivamente utilizando como inóculo 1 ml del caldo sembrado e incubándolas por 24 horas a 37°C.
La masa bacteriana obtenida del cultivo en cajas se recoge utilizando 1 ml de solución salinaisotónica y raspado con el asa.
Esta suspensión bacteriana se deposita en un matraz Erlenmeyer con perlas de vidrio y se somete a enfriamiento a temperatura de -5°C en una mezcla dehielo-acetona-sal la cual debe agitarse constantemente.
Se adicionan a la suspensión 4 ml de dioxano y se enfrían a 4°C por 24 horas. Posteriormente se realiza una centrifugación a 1500 g por 15 minutos y se...
Mahler y Cordes. Páginas: 591-592.
La catalasa (Peróxido de hidrogeno: peróxido de hidrogenooxidoreductasa) es una enzima con un grupo hemo, cuya función es la destrucción del peróxido de hidrogeno, producto de varias oxidaciones biológicas. La descomposición del peróxido de hidrogeno se puedeconsiderar como la oxidación de una molécula por otra. La reacción es:
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2H2O2 CATALASA O2 + 2 H2O
Puede utilizar como sustrato además del peróxido dehidrogeno, alquilos de peróxido de hidrogeno, etanol y ácido nitroso. El mecanismo de reacción es a través de la formación de un complejo catalasa – peróxido de hidrogeno. En los peroxisomas se encuentrangrandes cantidades de catalasa. En estos orgánulos, se generan grandes cantidades de H2O2, por lo que es necesaria la acción de la catalasa para convertirlo en agua.
2. Investigue bibliográficamentecomo puede hacerse un aislamiento, purificación y cristalización de la catalasa a partir del hígado, sangre, bacterias, o plantas.
Methods in Enzymology II. Páginas: 775-781, 781-784, 784-789,789-791.
Por método de: BACTERIAS
Se realiza una inoculación de estafilococos en un caldo cerebro corazón y se incuba durante 24 horas aproximadamente a 37°C. Posteriormente las cajas de agar 110 sesiembran masivamente utilizando como inóculo 1 ml del caldo sembrado e incubándolas por 24 horas a 37°C.
La masa bacteriana obtenida del cultivo en cajas se recoge utilizando 1 ml de solución salinaisotónica y raspado con el asa.
Esta suspensión bacteriana se deposita en un matraz Erlenmeyer con perlas de vidrio y se somete a enfriamiento a temperatura de -5°C en una mezcla dehielo-acetona-sal la cual debe agitarse constantemente.
Se adicionan a la suspensión 4 ml de dioxano y se enfrían a 4°C por 24 horas. Posteriormente se realiza una centrifugación a 1500 g por 15 minutos y se...
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