Practica 3
Páginas: 4 (930 palabras)
Publicado: 25 de marzo de 2011
TRONCO COMUN DIVISIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD. MODULO: ENERGIA Y CONSUMO DE SUSTANCIAS FUNDAMENTALES. PRACTICA No. 3 HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR AMILASA VEGETAL
OBJETIVO: Determinarla presencia de enzimas hidrolíticas durante la germinación por el método colorimétrico tomado como factor el tiempo de actividad enzimática.
GENERALIDADES: Investigación bibliográfica por parte delos estudiantes sobre cinética enzimática de amilasa y factores que afectan la germinación.
MATERIAL POR EQUIPO: 11 Tubos de ensaye (16 x 150) 1 Gradilla 4 Pipetas graduadas de 1 ml (plástico) 1Pipeta de 5 o 10 ml 1 Vaso de Precipitado de 250 ml 1 Mechero 1 Soporte Universal con anillo 1 Embudo de plástico 1 Mortero de porcelana con pistilo 1 Vaso de precipitado 1 Pipeta de 1 ml. REACTIVOS:Solución de glucosa al 1% Agua destilada Acido 3,5-Dinitrosalicilico (DNS) en frasco ambar.
1
Solución de Yodo (I2Kl en una solución de HCl 0.05 N) en frasco ambar. Solución de CaCl2 20 mM-NaCl200 Mm Solución de Almidón al 0.2 Solución Buffer pH 5
APARATOS POR GRUPO: 1 Balanza Granataria 2 Espectrofotómetros 8 Celdas
LOS ALUMNOS DEBEN TRAER POR EQUIPO: 10-12 Semillas de maíz (Zeamays) ó Frijol (Phaseolus vulgaris) de 7-8 días de germinación. 1 plumón indeleble. Jabón y franela para limpiar Hielo 3 Sobres de gasa Masking tape Ligas.
METODO: 1. Pesar de 10 a 12 semillasgerminadas de maíz o fríjol de 7 a 8 días de germinación para la obtención de la amilasa. 2. Moler las semillas en un mortero usando 3 ml de agua destilada por cada gramo de tejido. 3. Filtrar la molienda conayuda del embudo y de dos capas de gasa. 4. Mantener el filtrado en un tubo de ensaye. Permitir que se sedimente y mantenerlo en un baño de hielo. 5. Diluya el filtrado 1:10 con soluciónamortiguadora de acetato pH 5.0, seguir manteniendo en frio. 6. Prepare la mezcla de reacción en dos tubos de ensaye (13 x 150 mm) de la siguiente manera:
Tubo AYB
Almidón 0.2% en buffer pH 5.0 4 ml...
OBJETIVO: Determinarla presencia de enzimas hidrolíticas durante la germinación por el método colorimétrico tomado como factor el tiempo de actividad enzimática.
GENERALIDADES: Investigación bibliográfica por parte delos estudiantes sobre cinética enzimática de amilasa y factores que afectan la germinación.
MATERIAL POR EQUIPO: 11 Tubos de ensaye (16 x 150) 1 Gradilla 4 Pipetas graduadas de 1 ml (plástico) 1Pipeta de 5 o 10 ml 1 Vaso de Precipitado de 250 ml 1 Mechero 1 Soporte Universal con anillo 1 Embudo de plástico 1 Mortero de porcelana con pistilo 1 Vaso de precipitado 1 Pipeta de 1 ml. REACTIVOS:Solución de glucosa al 1% Agua destilada Acido 3,5-Dinitrosalicilico (DNS) en frasco ambar.
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Solución de Yodo (I2Kl en una solución de HCl 0.05 N) en frasco ambar. Solución de CaCl2 20 mM-NaCl200 Mm Solución de Almidón al 0.2 Solución Buffer pH 5
APARATOS POR GRUPO: 1 Balanza Granataria 2 Espectrofotómetros 8 Celdas
LOS ALUMNOS DEBEN TRAER POR EQUIPO: 10-12 Semillas de maíz (Zeamays) ó Frijol (Phaseolus vulgaris) de 7-8 días de germinación. 1 plumón indeleble. Jabón y franela para limpiar Hielo 3 Sobres de gasa Masking tape Ligas.
METODO: 1. Pesar de 10 a 12 semillasgerminadas de maíz o fríjol de 7 a 8 días de germinación para la obtención de la amilasa. 2. Moler las semillas en un mortero usando 3 ml de agua destilada por cada gramo de tejido. 3. Filtrar la molienda conayuda del embudo y de dos capas de gasa. 4. Mantener el filtrado en un tubo de ensaye. Permitir que se sedimente y mantenerlo en un baño de hielo. 5. Diluya el filtrado 1:10 con soluciónamortiguadora de acetato pH 5.0, seguir manteniendo en frio. 6. Prepare la mezcla de reacción en dos tubos de ensaye (13 x 150 mm) de la siguiente manera:
Tubo AYB
Almidón 0.2% en buffer pH 5.0 4 ml...
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