practica 3





HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR AMILASA VEGETAL

Energía y Consumo de Substancias Fundamentales.

Prof.: Ing. Manuel Martínez Garrido.
Grupo: BC51

Equipo:
García Espinoza René Omar
Mendoza Velázquez Julio Cesar
Rubio Ledezma Ricardo
Téllez Melgarejo Ana Karen

HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR AMILASA VEGETAL


Introducción
El almidón es un polisacárido muy abundante en losvegetales en los cuales se encuentra generalmente en forma de pequeños gránulos microscópicos de estructura cristalina.
ALMIDON

El grano de almidón está formado por amilosa y amilopectina. La amilopectina se encuentra en la parte exterior del grano, es insoluble en agua y no da coloración con la solución de lugol. La amilosa se encuentraen la parte interna y da coloración violeta en presencia de lugol.



Por otro lado, la amilasa cataliza la hidrólisis del almidón, glucógeno y dextrinas superiores en moléculas cada vez más pequeñas, en un proceso progresivo dando como producto final el disacárido maltosa.


La amilasa es una mezcla de enzimas.
En el hombre la encontramos en la boca (amilasa salival) y en elintestino (amilasa pancreática). La amilasa pancreática se considera idéntica en su acción a la amilasa salival. El pH óptimo para la amilasa salival es de 6.6. Cuando se encuentra en medios con pH más ácidos o más alcalinos, la actividad de la enzima disminuye o se inhibe por completo. La presencia de sales también modifica la actividad de esta enzima.
En esta práctica, el avance de la hidrólisisdel almidón se demostrará siguiendo la formación del complejo con yodo el cual da una coloración violeta con los almidones. A medida que se va efectuado la hidrólisis, el color azul va desapareciendo y aparece un color rojizo (eritrodextrinas) y posteriormente se observa una coloración amarilla, debida únicamente a la solución de yodo, lo que demuestra que el almidón ha sido hidrolizado hastamaltosa.
almidon almidon soluble dextrinas superiores+ molecula de maltosa acodextrinas +molecula de maltosa MALTOSA

Objetivo :

Determinar la presencia de enzimas hidrológicas durante la germinación por el método colorimétrico tomado como factor el tiempo de actividad enzimática.

Material:

-tubos de ensayo de (16 x 150)
-gradillas
-pipetas graduadasde 1ml (plástico)
-pipeta de 5 o 10 ml
-vaso de precipitado de 250 ml
-mechero
-soporte universal con anillo
-embudo de plástico
-mortero de porcelana con pistilo
-vaso de precipitado
-pipeta de 1 ml
-balanza granataria
-espectrofotómetros
-Celdas
-Semillas de maíz, frijol o lenteja de 7-8 días de germinación
-plumón indeleble.
-jabón y franela para limpiar
-hielo
-sobres de gasa-Masking tape
-ligas



Reactivos:

-solución de glucosa al 0.1 %
-agua destilada
-acido 3,5- Dinitrosalicilico (DNS) en frasco ámbar
-solución de yodo (I2KL en una solución de HCL 0.05 N) en frasco ámbar.
-Solución de CaCl2 20 mM – NaCl 200 mM
-solución de almidón al 0.2%
-solución Buffer pH 5
METODO:
1. Se le quito la parte más blanca de la semilla que sería la raíz y parte deltallo, de todotipo de semillas y lavarlas para quitar las impurezas, se pusieron todo dentro de un recipiente y se peso en la balanza granataria...
2.-Se molió todo dentro del mortero usando como solvente 3 mililitros de agua destilada por cada gramo de tejido.
3.-Se filtro la molienda con ayuda del embudo y de dos capas de gasa.
4.-Se paso lo filtrado en un tubo de ensaye. Y se dejo sedimentar,manteniéndolo a una temperatura más baja que la ambiente, con ayuda de hielo.
5.-Se diluyo lo obtenido en una solución 1: 10 con solución amortiguadora de acetato pH 5 pero se siguió manteniendo frio.
6.-Se preparo en dos tubos de ensaye (13 x 150 mm) de la siguiente manera:

Tubo
Almidón 0.2% en buffer pH 5.0
Solución CaCl-NaCl
A y B
4 ml
4 ml
NOTA . Nuestro equipo de enfoco a...