PRACTICA 45

1. Explique con sus propias palabras la diferencia entre transmitancia y absorbancia

Que la absorbancia se refiere a la absorción de ciertas ondas electromagnéticas ( la luz) de alguna sustanciao algún organismo en cierto rango de frecuencias y la transmitancia se refiere a la longitud de ondas electromagnéticas (la luz) que puede atravesar una sustancia u organismo.


¿Puededeterminarse el crecimiento bacteriano con cualquiera de estas dos mediciones? ¿Por qué?


Si, estudios teóricos y experimentales han mostrado que soluciones diluidas de diferentes tipos de bacterias,independientemente del tamaño celular, tienen casi la misma absorbancia por unidad de concentración de peso seco. Esto quiere decir que, en soluciones diluidas, la absorbancia es directamente proporcional alpeso seco, independientemente del tamaño celular del microorganismo. Sin embargo, se encuentran absorbancias muy diferentes por partícula o por UFC (Unidad Formadora de Colonia) cuando los tamaños delas células bacterianas son diferentes. Por esta razón, para estimar el número de microorganismos totales o el número de microorganismos viables de una suspensión bacteriana debe realizarse una"curva de calibración" con cada tipo de microorganismo, sólo de esta forma es posible relacionar Absorbancia (Densidad Óptica) con el número de microorganismos totales o con UFC.



2. ¿Cuál es lalongitud de onda de la luz utilizada para determinar el crecimiento bacteriano mediante espectrofotometría?

540nm



3. ¿Cuándo se utiliza un nefelómetro, cuál es el fundamento para determinar elcrecimiento bacteriano?

Es un instrumento para medir algún agente suspendido en un líquido, en este caso bacterias. Esto lo hace empleando una fotocelda colocada en un ángulo de 90° con respecto auna fuente luminosa. La densidad de bacterias es entonces una función de la luz reflejada por las bacterias a la fotocelda. La cantidad de luz que se refleje por una determinada densidad de bacterias...