Practica 6: Tinció Dels Lipids

PRÀCTICA 6 : TINCIÓ DELS LÍPIDS

Objectiu: Reconèixer els greixos en diverses solucions amb la tinció Sudan III

Material:
- 5 tubs d'assaig
- Gradeta
- Pipetes

Reactius:
- Oli vegetal
- Llet sencera
- Aigua destil·lada
- Clara d’ou
- Sudan III (colorant específic pels greixos)
- Dissolució de HCl al 20% o de HNO3 al 20%
- Aigua destil.lada

Mètode:
1.Numereu els tubs d'assaig.
2. En el tub nº 1 hi poseu 5mL d'aigua destil.lada.
En el tub nº 2 hi poseu 5mL de llet sencera.
En el tub nº 3 hi poseu 5mL de llet sencera i 3mL d’aigua destil·lada. Agiteu-ho i
després hi afegiu 6 gotes d'àcid. Observeu el que hi passa.
En el tub nº 4 hi poseu 5mL d’aigua destil.lada i 2 mL d’oli.
En el tub nº 5 hi poseu 3mL de clarad’ou.
En el tub nº 6 5 mL de llet semidesnatada
En el tub nº 7 5 mL de llet semidesnatada i 3 mL d’aigua destil·lada. Agiteu-ho i després hi afegiu 6 gotes d'àcid. Observeu el que hi passa.
En el tub nº 8 5mL de llet desnatada
En el tub nº 9 5mL de llet desnatada i 3 mL d’aigua destil·lada. Agiteu-ho i
després hi afegiu 6 gotes d'àcid. Observeu el que hi passa.

3. A tots elstubs hi afegiu 8 o 10 gotes de sudan III.
4. Agiteu els tubs i anoteu les observacions.
L'aparició d'un color rosat-taronjat intens indica la presència de greixos.

Resultats i Qüestions:
1. Fes un disseny gràfic de la pràctica.
2. Fes una taula amb els resultats obtinguts.
3. Fes una anàlisi dels resultats.
4. Quins són els components químics de la llet?
5. Explica per què no quedatenyida de la mateixa manera la llet del tub 2 i la del
tub 3. Quin efecte té l’àcid sobre la llet? Què hi ha en cada fase del tub 3?
1. Fes un disseny gràfic de la pràctica

2. Fes una taula amb els resultats obtinguts
| Aigua destil·lada | Llet sencera | Llet sencera, H2O | H2O i oli | Clara d’ou |
Presència de greixos | - | + | + | + | - |

| Llet semidesnatada | Lletsemidesnatada, H2O | Llet desnatada | Llet desnatada, H2O |
Presència de greixos | + | + | + | + |

3.Fes una anàlisi dels resultats

En el primer tub, on hi havia l’aigua destil·lada, no hi havia d’haver cap reacció ja que utilitzàvem aquest tub com a control i servia com a patró per analitzar els resultats obtinguts. Com que l’aigua no té greixos, finalment hem vist que quan el resultat era negatiula dissolució que quedava era una mica més fosca però del mateix color.(1)

En el tub de la llet sencera, sí que s’hi ha donat lloc la reacció ja que la llet està formada per glúcids (lactosa), lípids (hi abunden els triacilglicèrids), sèrum i proteïnes.(2)

En el cas de la tercera dissolució, l’àcid acidifica el medi de tal manera que desnaturalitza les proteïnes de la llet (com per exemplela caseïna) a causa de la modificació del pH. Aquestes precipiten al fons de la dissolució de manera que els lípids queden a la part superior i les proteïnes desnaturalitzades queden al fons sense tenyir-se (ja que el Sudan III tenyeix de color més lilós la franja superior on hi ha els lípids).(3)

Seguidament en el tub nº 4, s’hi distingeix clarament una franja més taronjada a la partsuperior. Això és degut a que l’oli al ser menys dens queda per sobre de l’aigua i el Sudan III tenyeix només a l’oli ja que aquest està format per lípids (trioleïna). En canvi a l’aigua no li ha passat res perquè no està formada per lípids.(4)

Finalment en el tub nº 5, no s’hi ha donat lloc la reacció ja que el component majoritari de la clara d’ou són les proteïnes i no pas la presència de lípids,per tant al afegir-hi Sudan III no s’ha tenyit de cap color.(5)

5
4
3
2
1

En teoria, al repetir els passos amb la llet desnatada (6) i la llet semidesnatada (7), com que aquestes posseeixen una menor quantitat de greixos, el seu color hauria de ser més semblant al de l’aigua destil·lada (el de control) que el de l’oli (tot greix). A la pràctica, els resultats no són aquests cosa que fa...