PRACTICA 7 MICROBIOLOG A

 Universidad Autónoma de Nuevo León

Facultad de Ciencias Biológicas

Métodos básicos en el Laboratorio de Microbiología

Práctica # 7:
Control de calidad en los medios de cultivo, prueba de esterilidad y promoción de crecimiento

Elisa Monserrat Fresnillo Lozano
Grupo: 243
Q.B.P

Profesor: M.C Francisco Javier Sánchez Velázquez

24 de marzo de 2015, San Nicolás de los Garza

PRÁCTICA NO. 7CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE CULTIVO: PRUEBA DE ESTERILIDAD Y PROMOCIÓN DEL CRECIMIENTO

Elementos de competencia:
Determinar la calidad a medios de cultivo preparados, mediante prueba de esterilidad, características fisicoquímicas y prueba de crecimiento microbiano.
Comprender la necesidad del aseguramiento de la calidad de los medios de cultivo que se manejan en el laboratorio demicrobiología.
Realizar prueba de esterilidad a los medios de cultivo antes de ser utilizados para el cultivo de microorganismos.
Comprender la importancia de trabajar con medios de cultivo realmente estériles y libres de microorganismos viables.
Verificar características fisicoquímicas y capacidad del medio de cultivo para promover el crecimiento microbiano.

Fundamento:

Los medios de cultivo son esencialesen el laboratorio de microbiología, por lo tanto es necesario contar con un control de calidad de los mismos, desde su fabricación, preparación, conservación hasta su uso, que nos asegure la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de nuestros resultados. En primera instancia los medios de cultivo que se manejen en el laboratorio, deben cumplir con los requisitos mínimos ( especificaciones decalidad) que marca la NOM-065-SSA1-1993. El laboratorio debe registrar las fechas de recepción, apertura del envase y caducidad de cada uno de los medios. Pero además los medios de cultivo ya preparados deben ser validados antes de su utilización, mediante la verificación de pruebas de esterilidad, de recuperación y propagación de microorganismos y también con pruebas fisicoquímicas que lescorrespondan.



Material / Equipo:
1. Medios de cultivo en placas y tubos.
2. Cultivos microbianos de Escherichia coli, Staphylococcus aureus en caldo nutritivo.
3. Mechero
4. Gradilla para tubos de 13 X 100.
5. Asa bacteriológica
6. Alcohol al 70%
7. Cerillos, algodón, etiquetas
8. Incubadora
9. 1 marcador para escribir sobre vidrio ( Sharpie)



Método:

1.- Revise el color y la solidez de losagares en placas y tubos.

2.- Revise el color y pH de los medios líquidos ( use solo un tubo para determinar el pH).

3.- Revise el color y grado de solidez del agar blando (medio semisólido).

4.- Coloque una placa y un tubo de cada uno de los diferentes medios de cultivo sin inocularlos, en una incubadora a 37°C por 24 horas, para la prueba de esterilidad.

5.- Inocule una placa de losmedios correspondientes, por estría simple, tomando una gota del cultivo microbiano correspondiente con el asa bacteriológica. ( trazando líneas horizontales sobre el agar, evitando romperlo).

6.- También inocule un tubo de cada caldo, tome una gota del cultivo que corresponda con el asa bacteriológica y deposítela en el mismo.

7.- Lleve a incubar todos los medios inoculados a 37°C por 24 horas.8.-Después del período de incubación revise los medios de cultivo, no debe observarse desarrollo de colonias microbianas o turbidez en los no inoculados, pero los que si se inocularon deben presentar crecimiento con características que correspondan al microorganismo inoculado.

9.- Reporte si los medios de cultivo cumplieron con la prueba de esterilidad.

10.- Reporte en una tabla los resultadosque se obtuvieron para cada medio de cultivo que se revisó.

11.- Revise si los resultados corresponden a cada uno de los medios.

11.- Analice y discuta sus resultados

13.- Concluya en base a los objetivos planteados como competencias y los resultados obtenidos.
















R E S U L T A D O S
La prueba de esterilidad busca determinar contaminaciones microbianas en medios de cultivo...