Practica 8 Prueba De La Reductasimetria En La Leche Cruda 1

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Nombre del maestro: Francisco Javier Meraz Murillo
Nombre del alumno: Jose Miguel Martínez Paramo
Nombre del plantel: CECYTE COMPUERTAS
Practica: #8 Prueba de la reductasimetriaen la leche cruda
Fecha: 06/10/2015
Fundamento:
La mayoría de los gérmenes de la leche elaboran reductasas que modifican el potencial de óxido-reducción de la misma. Para demostrar ese fenómenobasta añadir a la leche una sustancia que se decolore al pasar de la forma oxidada a la forma reducida. La rapidez con que cambia de color está en función de la población bacteriana y, por ello, puedeser un índice del grado de contaminación de la leche. El colorante más empleado es el azul de metileno, pero también se pueden utilizar la resazurina y el cloruro de 2, 3,5, trifenil-tetrazolium, ya queson colorantes fácilmente absorbibles por las células vivas.
En general se admite que la decoloración es más rápida cuanto mayor es el número de microorganismos en la leche. Sin embargo, lasbacterias presentan distinta habilidad para reducir el azul de metileno, así el Streptococcus liquefaciens, los gérmenes del grupo coliaerogenos y los de la putrefacción (Bacillus subtilis) se muestranmuy activos. Las células somáticas presentes en la leche también influyen mucho en la velocidad de decoloración, sobre todo los leucocitos.
Material:
Tubos de ensayo con tapones estériles.
Bañomaría o estufa a 32°C.
Pipetas graduadasrightcenter
Reactivos:
Solución de azul de metileno. Prepara una solución madre diluyendo unos gramos de azul de metileno en alcohol de 96° hasta conseguir lasaturación.
Para preparar la solución de trabajo tomar 2.5 ml de la solución madre y adicionar 97.5 ml de agua destilada estéril.
Procedimiento:
1.- Agitar la leche y agregar 10 ml de leche a untubo de ensayo
2.- Añadirle 0.5 ml azul de metileno, evitar el contacto con la leche.
3.- Tapar los tubos e introducirlos en baño maría a 37°C
4.-Realizar dos ensayos simultáneos para cada muestra....