Practica Bacter



AREA DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS
QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO

SEPTIMO SEMESTRE GRUPO
BACTERIOLOGIA
Q.F.B. SAUL ABRAHAM SANCHEZ TORRES


PRACTICA #1 PRUEBAS PRELIMINARES
ALUMNO: Cynthia Samara Contreras Carranza

FECHA: Viernes 4 de septiembre de 2015____________

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Practica 1. Pruebas Bioquímicas Preliminares
OBJETIVO
Aplicar pruebas bioquímicas preliminarespara identificar las bacterias que el titular de la materia proporcionara al estudiante.
FUNDAMENTO
Estas pruebas bioquímicas se integran dentro del grupo que estudia la determinación de la capacidad de un microorganismo para utilizar un hidrato de carbono especifico incorporado en un medio de cultivo básico, originando un pH acido. El medio de cultivo lleva incorporado un indicador de color (rojofenol) de color rojo a pH alcalino y amarillo a pH acido.
La catalasa es una enzima que descompone al peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua, esta enzima es similar a la estructura de la hemoglobina. Excluyendo al género Streptococcus y algunos otros la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas tienen catalasa.
La base de esta prueba es demostrar la presencia de la enzimacatalasa, colocando 2 o 3 gotas al cultivo. Prueba de oxidasa
Básicamente es la detección de la enzima oxidasa, muy útil en la identificación de bacterias Gram (-). La reacción de la oxidasa se debe a la presencia del sistema de citocromo-oxidasa, la cual activa citocromos reducidos por oxígeno molecular, por la transferencia de un aceptor al estado terminal del sistema de transferencia deelectrones.
El sistema de citocromos está generalmente presente en organismos aeróbicos. Un resultado positivo a la oxidasa consiste en una serie de reacciones en las cuales un componente auto-oxidable del sistema de citocromo es al final catalizado. Utilizando un tubo capilar con tetrametil-p-phenylendiamina al 1%, se adiciona una pequeña cantidad a un cultivo bacteriano colocado sobre un papel filtro yobtenemos las siguientes reacciones: una reacción positiva (presencia de oxidasa) se indica por la apariencia de un color púrpura obscuro en el papel, en menos de 10 segundos; al contrario una reacción negativa, que consiste en una ausencia de color púrpura.
Prueba de catalasa
1. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur.
2. Suspender la bacteria
3.Detectar la formación de burbujas
Interpretación: La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
Prueba de oxidasa
1-Poner un trozo de papel de filtro sobre una de las tapaderas de una placa de Petri.
2-Añadir una gota delreactivo de oxidasa.
3-. Depositar sobre la reactiva masa bacteriana (actuar de forma rápida y con un asa de platino nueva o con un aplicador)
La reacción positiva la indica un color azul-violeta intenso antes de 10 segundos
Interpretación:
Determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN'N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta comocolor azul.
Tinción Gram
La tinción de Gram, también conocida como coloración de Gram, es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poderestudiarlas y clasificarlas.
La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen (esputo, orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga bacterias no identificadas. Los colorantes tiñen la pared de las bacterias de color morado y, tras unos minutos, se realiza un lavado del colorante. Después de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se...