Practica Bioquimica

Informe practico
Objetivos:

• Día 1:
- Iniciar un cultivo de levaduras y evaluar su crecimiento en ausencia y presencia de un inhibidor de la glucólisis.
- Evaluar la producción de CO2 por uncultivo de levaduras en ausencia y presencia de un inhibidor de la glucólisis.
• Día 2:
- Utilización de un método espectrofotométrico para determinar la concentración de glucosa.
- Determinacióndel consumo de glucosa por los cultivos de levaduras, en ausencia y presencia de un inhibidor de la glucólisis.
- Evaluar la viabilidad celular de los cultivos de Saccharomyces cereviseae expuestos yno expuestos al inhibidor de la glucólisis.

Resultados experimentales.
a)

b)

c)

d) Cuando se le agregó el inhibidor al cultivo, quedó de color rojo. Cuando se le agregó solución buffer,quedó de color naranja. En ausencia del inhibidor quedó de color amarillo, no cambio su color.

e) Ensayo de viabilidad con Trypan Blue.

Conclusiones:

En la primera grafica se puedeconcluir que en ausencia de inhibidor la absorbancia aumenta ya que las levaduras crecen, se produce la glucólisis. Aumenta la absorbancia de manera proporcional con respecto al tiempo, es decir mientrasque el tiempo transcurre la absorbancia aumenta.
En presencia de inhibidor aunque la gráfica no lo demuestre ya sea por producto de un error de estimación por parte del observador, de apreciacióndel espectrofotométrico o mala manipulación de instrumentos, se mantiene constante, no se producen cambios, ya que el inhibidor no permite que se realice la glucólisis. Otra hipótesis parafundamentar el error de la gráfica es que la enzima no se unió al sustrato por lo tanto no la inhibió.

A partir de la grafica de curva de calibración, vemos que la absorbancia aumenta cuando hay mayorconcentracion de glucosa, por lo tanto son directamente proporcionales. La pendiente se puede calcular a partir de la ecuación: absorbancia/ [glucosa].

La concentración de glucosa en presencia de...