Practica cromatografia en columna

Clave: 47
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA

OBJETIVOS:

a) Conocer la técnica de cromatografía en columna, sus características y los factores que en ella intervienen.

b) Utilizar la cromatografía en columna para la separación de mezclas de compuestos orgánicos.

c) Controlar por cromatografía en capa fina la separación de una mezcla de compuestos por cromatografía en columna.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

← Se le proporcionará 0.4 g de una mezcla de ácido benzóico/azul de metileno, de la cual separará el producto principal, por cromatografía en columna.

← Para empacar la columna sujétela en el soporte con las pinzas. Engrase la llave y manténgala en posición de cerrado.

← Prepare una suspensión de 10g de alúmina para columna en 8 mL de AcOEt y agite durante 5 minutospara eliminar las burbujas.

← A través del embudo vierta la suspensión en la columna golpeando ligeramente con los dedos para que el empacado sea uniforme.

← Abra la llave para eliminar el exceso de disolvente teniendo cuidado de no dejar secar la alúmina.

← En el vaso de 100 mL disuelva la mezcla problema con la mínima cantidad de AcOEt, y ayudándose con el agitador viértala con cuidado,para que quede colocada uniformemente por encima de la alúmina, abra la llave para que salga el eluyente y se adsorba la muestra aplicada, cuidando que no se seque la alúmina, eluya la mezcla con AcOEt.

← Colecte las fracciones (eluatos) de 6 mL de los frascos viales y controle la separación, haciendo c.c.f. a cada una de las fracciones ante una muestra de referencia (testigo).

← Eluya lascromatoplacas en mezcla de Hexano-Acetato de Etilo (2:1), revele con luz U.V.

← En cada cromatoplaca observe el cambio de la intensidad de la coloración de la mancha del producto principal. La elución y la separación terminan en el momento en que no aparece mancha.

← En un matraz reúna las fracciones que contienen la misma sustancia.

← Para recuperar la sustancia destile el exceso dedisolvente, utilizando una destilación simple, calentando con un baño maría eléctrico, deje en el matraz pera un residuo de 5 mL aproximadamente y viértalo en un vaso que termine de evaporar en la campana.

← Pese el producto recuperado, calcule el rendimiento.

RESULTADOS:

EXPERIMENTO 1. PURIFICACIÓN DE ÁCIDO BENZOICO

• se realizaron 5 eluatos

• se realizo la separación porcromatografía en capa fina, a partir de la tercer eluato ya no se noto en la cromatoplaca presencia del producto separado.

Ya que solo subieron las muestras 1, 2 y 3, estas fueron las que se mezclaron y se aplico la destilación simple, para obtener la muestra final de ac. Benzóico.

Muestra original: 0.4000 g
Muestra pesada: 0.3545g

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ANALISIS DE RESULTADOS:

• Se utilizó la técnicade cromatografía en columna para separar individualmente al ácido benzóico de el azul de metileno con el que se encontraba mezclado, identificándolo comparando su comportamiento cromatográfico con el de la sustancia patrón de ácido benzoico puro eluido en AcOet.
• Se realizaron 5 eluatos de entre 6 ml cada uno que se colocaron en 4 cromatoplacas para realizar cromatografía en capa fina,colocando el testigo de ácido benzoico para determinar dependiendo de las muestras que subieran en cuáles de ellas existía aún ácido benzoico.
• En las muestras 1 y 2 fue en las que se observó más muestra, también en la 3, pero ya era mínima la cantidad y en 5 y la 6 ya no se observaba muestra, así que se mezclaron las muestras 1,2 y 3, para después separar el eluyente del ácido por destilaciónsimple y así obtuvimos una muestra final de 0.3545g de una muestra inicial de 0.4000g con un rendimiento del 88.25 %, esto posiblemente debido a que la muestra inicial contenía demasiado azul de metileno mezclado en ella y esta parte se quedo en la columna, o también existe la posibilidad de que el eluato 4 tuviera también un poco más de muestra, aunque hubiese sido mínima ya que en la placa no...