Practica De Absorcion En Carbohidratos.
Determinación de carbohidratos en bebidas |
espectrofotometría |
Integrantes: |
Aguilar Rico EfrénAvendaño Chi PatriciaChacón Argaéz UrielEstrella Millan YordiManzanero Perez ClaudiaQuero Uc José AntonioSuárez Basto Jaime |
6 de noviembre de 2012 |
Los Carbohidratos (hidratos de Carbono) una de las cuatro clases principales de Biomolecular, Estánconstituidos en su estructura química por un grupo Aldehído o cetona con múltiples grupos hidroxilo. Estos Biocompuestos son un almacenamiento de energía, y un uso como combustible y metabolitos intermediarios.
Los monosacáridos, carbohidratos sencillos, son importantes moléculas oxidables, los monosacáridos simples con cuatro, cinco y seis átomos de carbono reciben el nombre de tetrosas, pentosasy hexosas. Estas moléculas contienen múltiples carbonos asimétricos. Donde se identifica a la Glucosa una hexosa, que proporciona la gran mayoría de energía en varios productos por su abundancia.
Los polisacáridos son polímeros naturales de los carbohidrato, constituidos por un gran número de unidades de monosacáridos unidos mediante enlaces glucidicos. Son carbohidratos que al hidrolizarse danunidades de monosacáridos.
Método Calorimétrico del Fenol – acido sulfúrico para microdeterminación de Carbohidratos totales.
El contenido total de Carbohidratos en casi todas las fuentes; Alimentos líquidos, extractos líquidos, materiales de celulosa pueden ser determinados. Azucares simples, oligosacáridos, polisacáridos y sus derivados dan un color amarillo-naranja muy estable cuandoreaccionan con fenol sulfúrico ya que este método determina todos los azucares: reductores, no reductores, sustituidos o polímeros.
La intensidad del color Naranja es proporcional a la cantidad total de carbohidratos presentes y esta absorbancia puede ser media a 492 nm. El complejo es estable por una buena cantidad de tiempo y alcanza su máximo desarrollo a los 30 minutos. La cantidad total decarbohidratos en la solución de ensayo puede ser determinada con referencia a una curva estándar de calibración preparada, para esto se debe seleccionar como estándar el carbohidrato presente en mayor cantidad en la muestra.
Reactivos.
Una disolución de glucosa de 100 mg/L.
Fenol, al 80% m/m en H2O (20g de agua por cada 20g de fenol).
Acido Sulfúrico Concentrado.
Materiales.
* Matrazde Erlenmeyer de 100 mL. Para el agua dd.
* 2 matraces de Erlenmeyer de 500 mL para las bebidas
* Guantes
* Pipetas automáticas mecánicas, de volumen ajustable de 1.000 y 100 μL (o 200 μL).
* Pipetas de Pasteur y tetina
* Parafilm
* Aspiradora para pipetas.
* Refresco.
* 20 tubos de ensayo de 16-20 mm de diámetro interno
* Gradilla para tubos de ensayo
* 4matraces aforados de 100 mL o 2 matraces aforados de 1000 mL
* Pipeta volumétrica de 5 mL
* 2 pipetas volumétricas de 10 mL.
Procedimiento.
Paso 1.
Tubos para la curva de calibrado: haciendo uso de la disolución patrón de glucosa (de 100 mg de glucosa/L) y agua dd tal y como se indica en la siguiente tabla.
muestra | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
ml de Glucosa | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 |1 |
Agua dd | 2 | 1.8 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 1 |
Tabla 1.1
Estos Tubos se utilizaran para construir una curva de calibrado, con valores de 0-100 μg de glucosa/2 mL de muestra. La muestra de 0 μg de glucosa/L de muestra se utilizara para preparar el reactivo en blanco.
Paso 2.
Anote el contenido calórico declarado en la etiqueta.
Paso3.
Descarbonate la bebida: Con las bebidas a temperaturaambiente vierta 100 mL en un matraz Erlenmeyer de 500 mL. Agite hasta que no se observe la formación de burbujas de dióxido de carbono.
Paso 4.
Tubos de muestra: mas abajo se dan los volúmenes a ser ensayados y el procedimiento de dilución de modo que las muestras probadas contengan 20-100 μg de glucosa /2mL. Después de efectuar la dilución tal como se indica, transfiera con una pipeta 1.0 mL...
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