Practica de albumina
----ALBUMINA----
Para la determinación colorimétrica cuantitativa de albúmina en suero o plasma.
RESUMEN Y PRINCIPIO
En1964, el verde de rromocresol (BCG) fue reportado como útil en la determinación cuantitativa de albúmina sérica por Bartholomew y Delaney y por Rodkey. Esta técnica de unión fue publicada nuevamente unaño más tarde por Rodkey quien describió un procedimiento colorimétrico inverso de BCG específico para la albúmina a un pH de 7.05 y 615 nm. Al mismo tiempo Watson reporto que el BCG era más sensiblepara la albúmina que el anaranjado de metilo o el HABA (ácido 2-(4'-hidroxiazo benceno)benzoico), dos compuestos también utilizados en la cuantificación de albúmina sérica por unión coloreada (teñida).El método presentado es esencialmente el de Dumas, Watson y Biggs modificado por el uso de citrato en lugar del amortiguador de succinato, un amortiguador de baja concentración y una lecturacolorimétrica final a 550 nm en lugar de 630 nm.
REACTIVOS
---Reactivo de Albúmina (líquido)
Contiene verde de bromocresol, 18.8 mg/dL en un regulador de citratos, pH 4.2±0.05 a 298 K (25°C). Tambiéncontiene surfactantes.
---Estándar de Albúmina (6.0 g/dL)
Solución acuosa de albúmina bovina fracción V. Contiene azida de sodio como conservador
Precaución: Unicamente para uso diagnóstico invitro.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO INCLUIDOS
- Espectrofotómetro capaz de leer absorbancias a 550 nm.
- Cubetas y tubos de ensayo
- Pipetas serológicas o automáticas
- Cronómetro.
RECOLECCIÓN YPREPARACIÓN DE LA MUESTRA
La muestra de elección es suero removido cuidadosamente del coágulo,. El plasma puede ser utilizado a partir de sangre recolectada ya sea con EDTA o heparina comoanticoagulantes.
Estabilidad de la muestra:
La albúmina es estable en suero durante una semana a temperatura ambiente, 1 mes a 2-8°C e indefinidamente cuando se congela.
Substancias interferentes:
El...
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