Practica De Bioquimica Aislamiento De Una Proteina (Caseina)

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LABORATORIO DE BIOQUÍMICA QUÍMICO FÁRMACO BIÓLOGO PLAN FLEXIBLE. PRACTICA #3 Materiales
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AISLAMIENTO DE UNAPROTEÍNA (CASEÍNA)

Vasos de precipitados Mechero, rejilla y trípode Varilla de vidrio o espátula Trompa de vacío Papel secante de laboratorio Matraz Erlenmeyer

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Leche descremada Acéticoglacial Carbonato cálcico en polvo Etanol 95% Etanol acuoso 25% Carbón activado

Método

1. Introducir 200 ml. de leche descremada en un vaso ancho de 600 ml. Anote la marca y todos los datos de laetiqueta nutrimental de la leche. 2. Calentar la leche hasta aproximadamente los 40° C y añadir gota a gota una disolución de ácido acético diluido (1 volumen de ácido acético glacial en 10 volúmenesde agua), con un gotero. Ajustando a su pH isoeléctrico de 4.8, midiendo el pH con papel indicador de intervalo 3.4 a 6.8. 3. Agitar suavemente la mezcla con una varilla de vidrio durante todo elproceso de adición. Continuar añadiendo ácido acético diluido hasta que no precipite más caseína. Debe evitarse un exceso de ácido porque puede hidrolizarse parte de la lactosa. Agitar la caseína hastaque se forma una gran masa amorfa. 4. Separar la caseína con ayuda de una varilla o espátula y colocarla en otro vaso. 5. Añadir, inmediatamente, 5 g de carbonato de calcio en polvo al primer vaso (quecontiene el líquido del que se ha separado la caseína). 6. Filtrar la masa de caseína al vacío durante aproximadamente 15 minutos para separar todo el líquido que sea posible (también puede filtrarsin vacío a través de tela de gasa). 7. Presionar la caseína con una espátula durante la operación de filtrado. 8. Colocar el producto entre varias toallas de papel para ayudar a secar la caseína.Cambiar el producto por lo menos en tres o cuatro ocasiones, poniendo nuevas toallas de papel, hasta que la caseína esté completamente seca. Dejar que la caseína se seque completamente al aire durante...