practica de espectrofotometro
Páginas: 4 (908 palabras)
Publicado: 16 de septiembre de 2014
PRACTICA DE ESPECTROFOTOMETRO
INTEGRANTES:
Introducción
La medida de la absorción de la luz por una sustancia en solución es un método
importante en el análisisbioquímico. La cantidad de luz absorbida es proporcional a la
concentración de la sustancia en solución. La absorción varía con la longitud de onda de la luz,
debiendo efectuarse la medida usandoluz de longitud de onda de máxima absorción λmax ), que
es característica de cada sustancia. Las sustancias coloreadas tienen una ¬λmax en la región
visible del espectro. Otras sustanciasabsorben luz de otras regiones del espectro (por ejemplo los
ácidos nucleicos absorben luz ultravioleta ) y no son detectadas por el ojo humano.
Para conocer la concentración de una sustanciacoloreada en solución se podría
comparar visualmente la intensidad de color de dicha solución frente a una o varias soluciones de
concentración conocida. Sin embargo resulta más preciso utilizar unaparato, el
espectrofotómetro, que mide la cantidad de luz que atraviesa una solución.
Ley de Lambert-Beer
La fracción de luz incidente absorbida por una solución a unalongitud de onda
determinada es proporcional al espesor de la capa absorbente (paso óptico) y a la concentración
de sustancia absorbente. Estos dos parámetros están combinados en la ley deLambert-Beer:
log Io/I = εcl
Io: intensidad de la luz incidente.
I: intensidad de la luz transmitida.
ε: coeficiente de absorción molar (en unidades de litros/mol x cm).
c: concentración de lasustancia absorbente (en moles/l).
l: paso óptico de la muestra que absorbe luz (en cm).
La expresión log Io/I se denomina absorbancia y se designa por A. Es una medida de la
cantidad de luzabsorbida por la solución. El porcentaje de transmitancia (%T = I/Io x 100) es una
medida la cantidad de luz que atraviesa la solución.
La ley de Lambert-Beer se cumple si la luz incidente...
INTEGRANTES:
Introducción
La medida de la absorción de la luz por una sustancia en solución es un método
importante en el análisisbioquímico. La cantidad de luz absorbida es proporcional a la
concentración de la sustancia en solución. La absorción varía con la longitud de onda de la luz,
debiendo efectuarse la medida usandoluz de longitud de onda de máxima absorción λmax ), que
es característica de cada sustancia. Las sustancias coloreadas tienen una ¬λmax en la región
visible del espectro. Otras sustanciasabsorben luz de otras regiones del espectro (por ejemplo los
ácidos nucleicos absorben luz ultravioleta ) y no son detectadas por el ojo humano.
Para conocer la concentración de una sustanciacoloreada en solución se podría
comparar visualmente la intensidad de color de dicha solución frente a una o varias soluciones de
concentración conocida. Sin embargo resulta más preciso utilizar unaparato, el
espectrofotómetro, que mide la cantidad de luz que atraviesa una solución.
Ley de Lambert-Beer
La fracción de luz incidente absorbida por una solución a unalongitud de onda
determinada es proporcional al espesor de la capa absorbente (paso óptico) y a la concentración
de sustancia absorbente. Estos dos parámetros están combinados en la ley deLambert-Beer:
log Io/I = εcl
Io: intensidad de la luz incidente.
I: intensidad de la luz transmitida.
ε: coeficiente de absorción molar (en unidades de litros/mol x cm).
c: concentración de lasustancia absorbente (en moles/l).
l: paso óptico de la muestra que absorbe luz (en cm).
La expresión log Io/I se denomina absorbancia y se designa por A. Es una medida de la
cantidad de luzabsorbida por la solución. El porcentaje de transmitancia (%T = I/Io x 100) es una
medida la cantidad de luz que atraviesa la solución.
La ley de Lambert-Beer se cumple si la luz incidente...
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