Practica de espectroscopia uv-visible

Práctica: Espectrofotometría de absorción visible

Objetivos:

El objetivo principal a lo largo de la práctica es aprender el uso del espectrofotómetro, así como también saber preparar un espectro de absorción y una curva estándar.

Introducción:

La espectrofotometría de absorción en las regiones ultravioleta y visible del espectro electromagnético es, posiblemente, la más utilizada enla práctica del análisis cuantitativo de todas las técnicas espectroscópicas. Asimismo, puede resultar de utilidad como técnica auxiliar para la determinación de estructuras de especies químicas. (Universidad de Salamanca, 2013).
El espectrofotómetro se basa en la absorción de radiación ultravioleta y visible por el analito, como consecuencia de lo cual se origina un estado activado queposteriormente elimina su exceso de energía en forma de calor. (Universidad de Salamanca, 2013).
Durante el trabajo experimental, se estarán realizando múltiples prácticas y tareas con el espectrofotómetro de absorción visible, el cual tiene el fin útil de medir la magnitud de absorbancia y la longitud de onda de la muestra en cuestión. Asimismo, se analizarán los resultados obtenidos y se fabricará ungráfico que represente la absorbancia obtenida contra la longitud de onda, eligiendo la más adecuada de esta última y realizando una curva estándar.
Consideraciones Teóricas:
 La región visible del espectro electromagnético abarca de 380 a 780 nm. Esta región del espectro es usada ampliamente en el laboratorio analítico. La siguiente tabla muestra la división de la región visible del espectro:Longitud de onda
(nm)
Color absorbido
Color reflejado
380
Ultravioleta
----------------------------------------
380-435
Violeta
Verde amarillento
435-480
Azul
Amarillo
480-490
Azul verduzco
Anaranjado
490-500
Verde azuloso
Rojo
500-560
Verde
Púrpura
560-580
Verde amarillento
Violeta
580-595
Amarillo
Azul
595-650
Anaranjado
Azul verduzco
650-780
Rojo
Verde azuloso780
Infrarrojo cercano
-----------------------------------------

Deben tomarse en cuenta los datos anteriores para el trabajo analítico en el VISIBLE.
La luz que utilizamos para leer, así como la luz del sol es policromática, contiene todas las longitudes de onda de la lista anterior. Cuando vemos un objeto, vemos luz reflejada. La luz reflejada es la que quedó de la iluminación “blanca”,después que el objeto absorbió varias longitudes de onda.

Cuando vemos una solución de Sulfato de cobre se ve azul porque los iones Cu(H2O)4+2 absorben luz amarilla.Si deseamos determinar la concentración de una solución de cobre debemos medir absorbancias y analizar la solución con luz amarilla porque se está trabajando con un instrumento que mide la absorción de la luz.
El análisis cualitativopor espectroscopia de absorción mide la absorbancia de una sustancia a varias longitudes de onda crecientes. Graficando ABSORBANCIA contra CONCENTRACIÓN, se obtiene la CURVA ESTÁNDAR O GRÁFICO DE LA LEY DE BEER Y LAMBERT.
En esta práctica, el alumno trabajará con un colorante rojo utilizado en alimentos, y determinará:
-El ESPECTRO DE ABSORCIÓN en el visible de este colorante.
-A partir delespectro seleccionará la longitud de onda que utilizará para la curva estándar.
-Elaborará la curva estándar y determinará la concentración de una muestra.

Desarrollo:
MATERIAL Y EQUIPO
·         1 espectrofotómetro para región Visible
·         6 matraces volumétricos o aforados de 100 ml
·         6 pipetas graduadas de 1 ml
·         2 vasos de precipitado de 250 ml
·         Papelsecante
Reactivos:
·         Colorante rojo para alimentos (2.5%) (TRAER POR EQUIPO)
·         Agua destilada

PROCEDIMIENTO:
1.- Consulte el manual de operación del espectrofotómetro y ajústelo de acuerdo a lo
establecido en él.

2.- Prepare las siguientes soluciones del colorante, utilizando agua:
Sol. N°1.-Concentración = 1000 ppm; prepare 100 ml.
Sol. N°2.- Concentración=100 ppm;...