Practica de grupos sanguineos

PRACTICA 3. TIPIFICACIÓN DE GRUPOS SANGUINEOS (SISTEMA ABO Y Rh)
INTRODUCCIÓN
El fundamento de la tipificación de grupos sanguíneos son las reacciones aglutinación, la cual se
puede definir como una reacción inmunológica que se lleva a cabo cuando se combinan antígenos
particulados con sus correspondientes anticuerpos específicos; a diferencia de las reacciones de
precipitación las cuales sedefinen como una reacción inmunológica cuando antígenos solubles y
polivalentes se combinan con sus anticuerpos específicos. En los dos casos se forman complejos
insolubles que son visibles y cuantificables; la reacción antígeno-anticuerpo depende de factores como el
pH, temperatura, interacciones iónicas, tiempo y la concentración, tanto del antígeno como del anticuerpo.
Las reacciones deaglutinación pueden ser activas (directas), en estas los antígenos son
componentes naturales de la partícula; la aglutinación también puede ser pasiva siendo los antígenos
acoplados a partículas artificiales.
Actualmente se sabe que el sistema ABO y del Rh son sustancias antigénicas que se encuentran
en la superficie de los eritrocitos; el sistema ABO fue descubierto en el año de 1901 por CarlLandstainer.
El sistema ABO consiste en que una persona posee en sus eritrocitos uno, dos o ninguno de los dos
antígenos (A y/o B), por lo que las personas pueden ser del tipo A, si solamente poseen en antígeno A;
del B, si solo poseen el antígeno B; del tipo AB si poseen ambos y del O si no poseen ninguno de los dos.
Los anticuerpos que se generan y circulan en sangre contra el antígeno que nose posee en el eritrocito
se les llaman isohemaglutininas.
El sistema Rh se describió en 1939 por Levine y Stetson en una mujer a la cual se le transfundió
sangre de su esposo y presento una reacción hemolítica severa; en 1940 Landstainer y Wiener confirman
el descubrimiento de este grupo sanguíneo en ensayos usando eritrocitos de monos (Macacus rhesus),
inmunizando conejos y cobayos,basándose en la suposición de que en los eritrocitos de los monos
podrían existir antígenos similares a los de humanos. El suero obtenido aglutinaba los eritrocitos de los
monos y del 85% de la población humana blanca. Levine fue quien sugirió que se conservara la
denominación Rh para el antígeno humano.
Se han identificado 5 antígenos del sistema Rh (C, c, D, E, e), siendo el D de dominanciaantigénica, por lo que las personas con antígeno D en sus eritrocitos se denominan Rh(+) y los que no lo
tienen se denominan Rh(-).
OBJETIVO
Poner en evidencia los principales grupos sanguíneos por efecto de una reacción de aglutinación
(hemaglutinación) directa e indirecta.
MATERIAL POR GRUPO
• Sueros anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D
• Centrifuga clínica
MATERIAL POR EQUIPO
• Una esponja ofranela para limpiar la mesa de trabajo antes y después de realizar la práctica.
• Equipo para obtener una muestra de sangre venosa (aguja, tubo al vacio con heparina, ligadura,
soporte para aguja y torundas).
• Placa para aglutinación de fondo blanco
• Aplicadores de madera
MATERIAL INDIVIDUAL
• Bata blanca
• Un par de guantes de látex
METODOLOGIA
1. Obtener la muestra de sangre venosa, unapor equipo.
2. Homogenizar suavemente la muestra obtenida.
3. Determinar sistema ABO y Rh en la muestra sanguínea (directo)
a) Depositar una gota de sangre en 4 pozos de la placa para aglutinación
b) Después una gota del antisuero Anti-A en el primer pozo, en el segundo Anti-B, en el tercero
Anti-AB y en el cuarto Anti-D
c) Mezclar suavemente el contenido de cada pozo con un aplicador demadera diferente hasta
observar la aglutinación.
d) Observar.
4. Determinación indirecta
a) Centrifugar la muestra sanguínea de cada equipo para obtener suero libre de células.
b) Después depositar una gota de eritrocitos de los cuales ya se sabe que antígeno tiene en su
superficie en al menos dos pozos de la placa.
c) Enseguida usar suero con el que no debe aglutinar y con uno que si...