Practica De Laboratorio 2 De Microbiologia

Introducción.
En la industria de los alimentos es necesario realizar análisis microbiológicos mediante estos nosotros logramos la identificación de colonias de microorganismos, por medio de la tinción con colorantes esta nos ayuda a obtener una mejor observación. ;
La preparación en fresco y la tensión simple es de vital importancia para poder aplicar los métodos de tinción que permiten laobservación de bacterias al microscopio óptico. Se realiza usando una pequeña cantidad de cultivo bacteriano, extendiéndola sobre un portaobjetos limpio y fijándola. Ya que la mayoría de bacterias no tienen colorantes y no pueden ser distinguidas se aplica colorantes para teñirlas y poder observarlas.
Existen muchos tipos de colorantes o reactivos los cuales se dividen en ácidos y básicos quetiñen especialmente bacterias ya que la membrana de estas suelen tener una cierta carga eléctrica negativa y a este grupo pertenecen la safranina fucsina básica , cristal violeta y Azul de metileno este es el único reactivo que utilizaremos.

Objetivo General
* Demostrar mis habilidades y destrezas en el laboratorio de microbiología de los alimentos.

Objetivos Específicos
* Conocer ladiferencia entre tinción simple y preparación en fresco.
* Reconocer algunas características morfológicas generales de las células representativas observadas en el microscopio.
* Conocer la forma en la que se encuentran agrupadas las colonias microbiológicas en la tinción simple y en preparación en fresco.



Marco teórico
Preparaciones en fresco:

La forma más simple depreparar un espécimen para su examen microscópico es hacer una preparación en fresco.
Existen dos técnicas:
Una preparación en fresco simple, que consiste en colocar una gota de líquido con los microorganismos sobre un portaobjetos y a continuación cubrirla con un cubreobjetos.
Una preparación en gota pendiente, esta preparación se realiza colocando una gota de la suspensión bacteriana en uncubreobjetos en el cual se ha hecho previamente un círculo con vaselina (actúa como sellador) o parafina; sobre el cubreobjetos se coloca un portaobjetos con una excavación central que queda adherido gracias a la vaselina. Se invierte la preparación y se observa colocándola en la platina del microscopio. La ventaja de esta última técnica, es que la preparación no se seca y puede ser observada duranteun tiempo más largo. Las preparaciones en fresco se utilizan para observar microorganismos vivos y observar: la movilidad, el tamaño y la forma de agrupación de los microorganismos en su estado natural y sin alteraciones; así como gránulos refráctiles, esporas si teñir y cloroplastos dentro de las células vivas. Sin embargo, el inconveniente de la observación en fresco es que no permite aumentarel contraste de la preparación por la escasa diferencia entre los índices de refracción del medio y de los microorganismos; por otra parte, el movimiento continuo de los microorganismos, así como el causado por las corrientes de fluido, frecuentemente hacen difícil la observación. Por tanto, su uso, con un microscopio óptico de campo claro, está bastante limitado.

Preparaciones en fresco:La preparación consiste en una capa de la muestra extendida sobre un portaobjetos libre de grasa. Esta preparación debe ser lo suficientemente delgada para permitir el paso de la luz a través de ella. El “extendido” o “frote” se puede hacer de varias maneras:
* Suspendiendo el desarrollo microbiano en una pequeña gota de agua mediante el asa y distribuyéndolo en el portaobjetos.
* Por“impronta”, presionando el porta sobre la muestra.
* Con cinta adhesiva transparente
* Con hisopo Colocando una gota de la muestra fluida en el porta. Los extendidos o frotes se dejan secar al aíre; para asegurar que las células queden adheridas al portaobjetos y no se desprendan durante los lavados que se realizan durante la tinción; la preparación se fija con calor moderado, pasando el...