Practica de laboratorio para formula roja

TEMA7

MANEJO DE MUESTRAS SANGUINEAS:

Segun la prueba a realizar extraera un mayor o menor volumen de sangre en un tipo u otro de recipiente, entre ellos cabe destacar:

- Porta objetos de cristal bien desengrasado: Suelen utilizarse para recogida de sangre capilar.
- Toma de sangre sobre capilares de vidrio, hay de dos tipos:
• Heparinizados: para ladeterminación del hematocrito y gasometria en neonatos. (color rojo)
• No heparinizados: Para la dterminación del tiempo de coagulación (azul)
- Toma sobre recipientes de plastico esteriles: Con anticoagulante incorporado en sus paredes, se recogen en ellos muestras para determinaciones como recuentos, formula leucocitaria, VSG, hemoglobina, etc.
- Toma sobre recipientes devidrio esteriles, con o sin anticoagulante incorporado. Suelen utilizarse para las pruebas anteriores, además de las pruebas de coagulación que los requieran.

ANTICOAGULANTES:

Cuando se requiere sangre total o plasma, se utilizan anticoagulantes químicos que permiten el estudio de sus componentes, ya que evita la coagulación sanguínea que haria imposible la manipulación técnica de lamuestra.

TIPOS DE ANTICOAGULANTES MÁS UTILIZADOS EN ANALISIS CLINICOS:

- Oxalato
- Citrato
- Fluoruro
- Edta
- Heparina: Es el anti coagulante presente en bajas concentraciones en la sangre humana normal.
a) Forma de utilización: Se encuentra en el comercio en forma de sa sódica, potásica o de litio. También se puede utilizar en forma de sal de amonio.
b)Mecanismos de acción: Inhibe la acción de protrombina a trombina, la transformación de fribrinogeno en fibrina por acción de la trombina y es un factoe estabilizador plaquetario( evita su aglutinación).
c) Concentraciones o dosis: lo más conveniente es utilizar 75 U de heparina por ml de sangre ( aproximadamente 0.75 mg/ml)

d) Preparación:

1º Se disuelven 300mg deheparinato de amonio en 20 ml de agua destilada.
2º En cada tubo se introduce el equivalente a 50 ul de solución por ml de sangre.
3º Se deseca a Tª de 90-100º C, cuando más alta es la temperatura de secado menor es la solubilidad del producto remanente.

e) Precauciones, ventajas e inconvenientes:
- Su precio es relativamente alto.
- A razon de 0,1-0,2 mg/ml desangre no afecta al volumen corpuscular.
- Es el mejor anticoagulante para prevenir la hemolisis y para las pruebas de fragilidad osmótica.
- No resulta satisfactorio su uso para el recuento de leucocitos o para la preparación de extensiones de sangre, pues en este segundo caso produce un fondo azul en las preparaciones teñidas con colorante de Wright.

f) Aplicaciones:
-Hematocrito
- Pruebas de fragilidad osmótica.

ERRORES DE MANIPULACIÓN DE MUESTRAS CON ANTICOAGULANTE:

Al utilizar cualquier anticoagulante hay que tener en cuenta:
• Las extensiones de sangre deben prepararse inmediatamente.
• Si en el plazo de 2-3 horas no van a llevarse a cabo otras determinaciones, la sangre debe refrigerarse a 4º C.
• Si lasangre se mantiene a Tª ambiente, es probable que entre 6- 24 horas se hinchen los eritrocitos elevándose el hematocrito y el VCM, disminuyendo la CHCM y la VSG.
• Durante 24 horas no se modifican: recuentos, hemoglobina, hematocrito y los indices eritrocitarios, si la sangre se ha mantenido incoagulada en EDTA y se ha almacenado a 4º C
• Homogenizar bien la sangre conanticoagulante.

MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS:

CONSERVACIÓN: En algunas ocasiones es necesario conservar las muestras durante un tiempo prolongado antes de su análisis para ello es importante que el TEL conozca:

Factores que influyen en la conservación de de una muestra:

- Temperatura: como norma general para la conservación de muestras en el laboratorio, se emplean las...