Practica De Laboratorio
Páginas: 3 (691 palabras)
Publicado: 7 de noviembre de 2012
Laboratorio Microbiología Medica PRACTICA No 9
Duración Aproximada 4 horas
Prueba bioquímica de la Urea
I PRINCIPIO La urea es una diamida del ácido carbónico, cuya hidrólisis por acción dela ureasa genera 2 moléculas de amoníaco. La ureasa es una enzima constitutiva que se sintetiza independientemente de la presencia o no de la urea. La prueba determina la capacidad de la bacteria paradesdoblar la urea, con la consiguiente alcalinización del medio. Es una actividad característica de especies de Proteus y se usa para diferenciar Klebsiella (+) de Escherichia (-) y Proteus (+rápido) de Providencia (-); Yersinia pseudotuberculosis (+) de Yersinia pestis (-) Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer. Elextracto de levadura es la única fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfatos constituyen el sistemabuffer, el rojo de fenol es el indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa. Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrógeno proveniente de la urea, lahidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo.
Su uso, se recomienda para diferenciarProteus spp., de otros géneros. Para organismos que hidrolizan la urea lentamente, es recomendable usar el medio de Christensen. II PREGUNTAS PREVIAS 1. Porque el medio de cultivo presenta bajocontenido de nutrientes y alta capacidad buffer? 2. Explique como se desarrolla la hidrolisis por la ureasa 3. Porque se dice que la ureasa es una enzima constitutiva y que otra ruta metabólica la puedesintetizar? III. MATERIALES El medio base, contiene los siguientes elementos:
Fórmula (en gramos por litro) Urea 20.0 g Fosfato monopotásico 9.1 g Fosfato disódico 9.5 g Extracto de levadura 0.1 g...
Duración Aproximada 4 horas
Prueba bioquímica de la Urea
I PRINCIPIO La urea es una diamida del ácido carbónico, cuya hidrólisis por acción dela ureasa genera 2 moléculas de amoníaco. La ureasa es una enzima constitutiva que se sintetiza independientemente de la presencia o no de la urea. La prueba determina la capacidad de la bacteria paradesdoblar la urea, con la consiguiente alcalinización del medio. Es una actividad característica de especies de Proteus y se usa para diferenciar Klebsiella (+) de Escherichia (-) y Proteus (+rápido) de Providencia (-); Yersinia pseudotuberculosis (+) de Yersinia pestis (-) Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer. Elextracto de levadura es la única fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfatos constituyen el sistemabuffer, el rojo de fenol es el indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa. Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrógeno proveniente de la urea, lahidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo.
Su uso, se recomienda para diferenciarProteus spp., de otros géneros. Para organismos que hidrolizan la urea lentamente, es recomendable usar el medio de Christensen. II PREGUNTAS PREVIAS 1. Porque el medio de cultivo presenta bajocontenido de nutrientes y alta capacidad buffer? 2. Explique como se desarrolla la hidrolisis por la ureasa 3. Porque se dice que la ureasa es una enzima constitutiva y que otra ruta metabólica la puedesintetizar? III. MATERIALES El medio base, contiene los siguientes elementos:
Fórmula (en gramos por litro) Urea 20.0 g Fosfato monopotásico 9.1 g Fosfato disódico 9.5 g Extracto de levadura 0.1 g...
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