Practica De Laboratorio




UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA
UNIDAD XOCHIMILCODivisión de Ciencias Biológicas y de la Salud.
Módulo II
“Procesos celulares fundamentales”

Práctica
“Métodos básicos para el aislamiento e identificación de enterobacterias del agua”


PROFESOR: Dr. José Félix Aguirre Garrido.
TURNO: Vespertino.








Primera sesión
Preparación de las muestras y cultivo en un medioselectivo.
Contenido.
I. Preparación de la zona estéril para trabajo microbiológico.
II. Cultivo de la muestra de agua en el medio Mac-Conkey.
III. Manejo de material contaminado.
Material y medios por equipo
Solicitar en el interlaboratorio de cristalería y reactivos
A) 4 cajas de agar Mac-Conkey
B) 1 mechero
Solicitar en el interlaboratorio de equipo
1 microscopio por equipo de trabajo
Cadaequipo debe traer esta sesión
A) Muestra de agua para el aislamiento de bacterias.
En un frasco de vidrio incoloro d boca ancha y con apón de rosca, colectar un volumen aproximado de 50 mL de agua de cualquier de las siguientes fuentes: desagüe, riego de hortalizas, remojo de verduras, lavado de algún puesto de tacos, jugos, mariscos o tortas. El máximo tiempo trascurrido después de colectar elagua, es de 6 horas y debe guardarse a 4°C
B) 2 asas bacteriológicas
C) Cerillo o encendedor
D) Material para preparar zona estéril para el trabajo microbiológico y para etiquetar las muestras.
Solución desinfectante preparada:
Traer cualquiera de las siguientes soluciones, perfectamente etiquetadas.
A) Hipoclorito de sodio al 10%: mezclar 100 mL de hipoclorito de sodio (cloro comercial), con 900 mLde agua, envasar en frasco de plástico de boca angosta muy bien cerrado con una tapa de rosca perfectamente etiquetado.
B) Solución de benzal diluida 1:1º con agua y envasada en un frasco ámbar con tapón de rosca, perfectamente etiquetado
I. Preparación de la zona estéril para el trabajo microbiológico
Una de las partes mas importantes del trtabajo microbilogico es realizar todos lospreocedimientos en una zona de trabajo esteril, ya que de esta manera se asegura que los microorganismos detectados provengan de las muestas estudiadas y no se trate de contaminacion prod¿cedente del medio ambiente o e la propia persona que realiza el ensayo. Por lo que es necesario llavar a cabo una adecuada preparacion de la zona de trabajo.
En general, el control de los microorganismos se puede llevar acabo limitando el crecimiento microbiano, proceso de inhibición, o bien destruyendo los microorganismos por esterilización, que es la muerte o eliminación de todos los organismos viables de un medio. Los agentes que destruyen o matan las bacterias son bactericidas, los que inhiben el crecimiento bacteriano son bacteriostáticos.
Para realizar este control se utilizan métodos de esterilización odesinfección. Los métodos de esterilización pueden ser físicos y deben garantizar la destrucción total de todos los microrganismos presentes en la sustancia o material esterilizado. La desinfección se realiza con agentes desinfectantes o antisépticos. Los desinfectantes son productos químicos que matan a los microrganismos y se utilizan sobre objetos inanimados. En cambio los antisépticos sonsustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los microorganismos y no son lo suficiente tóxicos para ser aplicados a los tejidos vivos.
El calor es el método más utilizado para esterilización de y se puede emplear al calor seco o el calor húmedo. Para el primero se utilizan hornos y en el segundo autoclaves. Para esterilizar por calor seco se requiere una temperatura de 170°C por una hora,...