Practica De Lipidos

|UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE CIENCIAS

PRÁCTICA I
PROPIEDADES GENERALES DE LOS LÍPIDOS
RESUMEN: Esta práctica perseguía 3 objetivos, el primero consistió en aislar el colesterol de la yema de huevo utilizando a la acetona como disolvente, se centrifugo a 2000 rpm obteniendo 2 extractos acetónicos A1 y A2. El segundo objetivo fue determinar cualitativamente elcolesterol mediante una reacción específica, con la prueba de Salkowski, y cuantitativamente con la prueba de Liebermann-Burchard en la que la reacción da positivo a la presencia de colesterol; esteroides, da una coloración azul-verde, y. El tercer objetivo fue estudiar la solubilidad del aceite de oliva en un disolvente polar; agua y en otro disolvente apolar; acetona.
INTRODUCCIÓN: Los lípidos sonun tipo de biomoléculas que se distinguen por su solubilidad característica, debido a su naturaleza hidrófoba, son mas solubles en solventes no polares como el éter dietílico, metanol y hexano que en agua, además de contener carbono e hidrogeno, elementos que les confieren el carácter no polar, también pueden contener oxigeno, nitrógeno y fósforo.
Los grupos químicos funcionales mas comunes sonlos enlaces carbono-carbono sencillo y doble, los esteres de carboxilato, ésteres de fosfato y las amidas. Los lípidos no polares denominados graso son las principales moléculas de almacenamiento de energía en la mayoría de los organismos.
Algunos de los lípidos polares, que contienen nitrógeno y fósforo, son componentes importantes de las membranas biológicas las cuales están constituidas porlípidos y proteínas formando barreras moleculares alrededor de las células y sus organelos. Las moléculas proteicas de la membrana actúan como canales y compuertas que regulan el transporte de materiales hacia el interior y exterior de la célula. Los esteroides son tipo de lípidos representados por el colesterol el cual se encuentra en las membranas biológicas y se utiliza como precursor de muchashormonas.
Al ser una clase bastante heterogénea de compuestos, se han clasificado tradicionalmente en 1) ácil gliceroles, 2) fosfolípidos, 3) esfingolipidos, 4) glicolipidos, 5) lípidos terpenoides, incluyendo carotenoides y esteroides.
METODOLOGÍA:
A. Extracción de colesterol de la yema de huevo.
Cascar un huevo de gallina con precaución y separar la clara de la yema, teniendo cuidado de noromper esta. Decantar la clara.
Añadir sobre la yema 10 ml de acetona fría y agitar con la varilla, hasta obtener una suspensión homogénea.
Verter el contenido en dos tubos de centrífuga y equilibrarlos.
Centrifugar a la máxima velocidad en la centrífuga de mesa durante 15 minutos.
Concluida la centrifugación (cuando la centrífuga este totalmente parada) sacar los tubos con sumo cuidado,retirar el sobrenadante con una pipeta Pasteur.
Guardar el sobrenadante, al que llamaremos extracto acetónico A1.
Agregar 10 ml de acetona al pellet (pastilla), agitar con una varilla y repetir todo el proceso otra vez para una segunda extracción de colesterol. El segundo extracto obtenido se llamará extracto acetónico A2.

B. Detección cualitativa de esteroides.
Rotular adecuadamente lostubos del 1 al 4.
Pipetear en cada uno de los tubos los siguientes volúmenes (en ml) de las soluciones que se te piden:
Prueba de Salkowski
# TUBO 1 2 3 4
Colesterol 0 1 mL 0 0
Agua destilada 1 mL 0 1 mL 1 mL
Ácido Sulfúrico* 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Extracto A1 0 0 1 mL 0
Extracto A2 0 0 0 1 mL
* Resbalar por el tubo para formar una capa en el fondo
3. Se mueven los tubos en el planohorizontal, con el fin de conseguir un buen mezclado en la zona de contacto, pero sin llegar a mezclar totalmente ambas fases.
4. La reacción es positiva, indicando la presencia de colesterol cuando se observa una coloración azul-verde.

C. Detección cuantitativa de colesterol
1. Rotular 7 tubos de ensayo del 1 al 7.
2. Pipetear (usar una propipeta) en cada uno de los tubos los siguientes...