Practica De Microbiologia

Practica nº 3:
“Acción de los Agentes Físicos y Químicos sobre los Microorganismo”

INTRODUCCIÓN
Los distintos factores ambientales (temperatura, pH, oxígeno, concentración de solutos u osmolaridad, etc.) afectan al crecimiento microbiano, provocando su muerte o inhibiendo su crecimiento.Estos factores se dividen en agentes físicos, químicos o biológicos.

Así el término bactericidasignifica que en el proceso se destruyen bacterias mientras que bacteriostático implica que el proceso impide la proliferación bacteriana.

La acción de los agentes depende de los siguientes factores:
• El tipo de microorganismo con el que se ponga en contacto y la carga inicial del mismo.
• La dosis del agente, que involucra la concentración o intensidad aplicada durante un determinado tiempo.• El medio en el cual se encuentran los microoganismos.

*FISICOS
Temperatura: Afectan a los microorganismos en Funcionamiento y crecimiento:

» Actividad enzimática
» Fluidez de la membrana
» Estabilidad del material genético
» Organelos y otras estructuras intracelulares, Ej. Ribosomas



Teniendo en cuenta la temperatura, podemos clasificar a los microorganismos en:
•Mesófilos: Son capaces de desarrollarse a temperaturas que pueden oscilar entre los 20-45ºC. Temperatura óptima = 35-37ºC.
• Termófilos: Son capaces de desarrollarse a temperaturas superiores a los 45ºC.
• Sicrófilos: Son capaces de desarrollarse a temperaturas que oscilan entre 0-20ºC.

PH: El pH óptimo en el que se desarrollan la mayoría de los microorganismos es neutro, que oscila entre 6,5 - 7,5.Los bacterias que se desarrollan a pH = 4 se denominan “acidófilos”.
En ocasiones, como consecuencia del metabolismo bacteriano, se producen residuos que acidifican el medio. Para mantener el medio neutro se utilizan tampones. El más utilizado es el de sales fosfato.

*QUÍMICAS
Antisépticos: Agentes microbicidas que pueden aplicarse sobre la piel y mucosas pero no pueden ser utilizadosinternamente. Ej: nitrato de plata, solución de yodo, alcoholes, detergentes.

Desinfectantes: Agentes que matan microorganismos pero no sus esporas y solo se deben aplicarse sobre objetos inanimados como mesas, pisos, utensilios, etc. Ej: cloro, hipoclorito, compuestos clorados, soda, sulfato de cobre, compuestos de amonio cuaternario, etc.
La acción de desinfectantes y antisépticos depende devarios factores, entre ellos:
• La concentración del agente químico
• La clase y número de microorganismos presente.

Los dos modos de acción más comunes de antisépticos y desinfectantes son:
• Daño a los lípidos y/o proteínas de la membrana citoplasmática resultando en su ruptura y en la salida del material celular.
• Desnaturalización de enzimas y otras proteínas generalmente porruptura de puentes de hidrógeno y disulfuro. Bloquean el metabolismo.
MATERIALES Y METODO

A. ACCIÓN DE AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS SOBRE LOS MICROORGANISMOS
A.1- ACCION DE LA TEMPERATURA DE EBULLICION
MATERIALES Y REACTIVOS:
Material Biológico:
*Cultivos puros bacterianos de:
(1) *Bacillus subtilis. (Gram +)
(2) *Escherichia coli (Gram - )
(3) *Staphylococcus aureus (Gram + )
Material deLaboratorio:
*Asa bacteriologica
*Pinza de metal de punta fina.
*Discos de papel filtro estériles.
*Hisopos de madera c/algodón estériles.
*Placas de petri con agar común.
*Mechero de alcohol.
*Frascos de penicilina con solución salina fisiológica.
PROCEDIMIENTO:
En 3 Tubos con caldo común, sembrar por SUSPENSION, el cultivo puro bacteriano 1.

Repetir la siembra en otros 3 tubos conel cultivo puro bacteriano 2.

Someter los tubos preparados rotulados a EBULLICION.

Una serie de 2 tubos a 1min. Otros 2 tubos a 5min y los 2 últimos a 10min.
Encubar a 37 ºC por 24 hrs.

Luego observar los tubos de ensayo si hubo crecimiento de bacterias o no.

RESULTADO:

Material biológico: (1) Bacillus subtilis. (Gram +)
Tipo de siembra: Suspensión

OBSERVACIONES:...