Practica De Microbiologia

PRACTICA # 1 Esterilización
Objetivo: aprender a esterilizar con calor húmedo, usando la olla de presión.

PASOS PARA ESTERILIZAR CON OLLA DE PRESION (CALOR HUMEDO)
1. Verificar el nivel del agua.
2. Introducir el material.
3. Tapar la olla con la válvula abierta, para purgar, y ajustar de dos en dos y opuestos los tornillos con la misma fuerza.
4. Dejar salir de 2 a 3 minutosel vapor para ‘purgar’ luego serrar válvula vigilando constantemente el manómetro.
5. Al llegar a la presión A 15 PSI (libras por pulgadas cuadradas) mantener en esa presión controlando el calentamiento durante 15 minutos A 121°C.
6. Apagar o bajar totalmente la temperatura y esperar a que baje la presión a cero. Hasta entonces abrir la olla.

PRACTICA # 2
TECNICAS DE SIEMBRA YAISLAMIENTO
OBJETIVO:
Conocer las diferentes técnicas de siembra y aislamiento que se utilizan para obtener una muestra.
INTRODUCCION
y en un solo extremo de la placa empiezas hacer varias "rayas" o estrias sin separar el asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente flameas el asa hasta que de un color rojo incandesente, enfrias la asa en un extremo del agar, posteriormente delultimo extremo de la anterior estria, vuelves hacer "rayas" o estrias, repitiendo èsto hasta que formes en la placa en los costados una formaciòn de 4 estrias, para que al ultimo hagas una forma de S en medio de la placa, evitando que toque las demas estrias ya realizadas.
Difusión: el inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya solidificado, y lo unico que haces es esparcirlo sobre toda lasuperficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de ponerla en contacto con el medio.
Placa Vaciada: el inoculo se mezcla con el agar, a una temperatura adecuada para que no elimine los posibles microorganismos presente en la muestra, y tambien para que se pueda incorporar bien el agar,que aún debe estar liquido, con la muestra

AislamientoEs la separación de un determinado microorganismo del resto de microorganismos que le acompañan. El método más usual es la siembra por estría sobre un medio de cultivo sólido adecuado dispuesto en una placa de petri.

Para ello se toma una pequeña cantidad de muestra con un asa de platino y se reparte sobre la superficie del medio de cultivo. Sobre el medio quedan separadas e inmovilizadas lascélulas bacterianas. Tras la incubación en condiciones adecuadas, cada célula viable origina una colonia visible resultado de sucesivas divisiones celulares. Cada colonia bacteriana tiene unas características determinadas en cuanto a su forma, borde, elevación, tamaño , consistencia, etc.. Los tipos de bacterias presentes en la muestra original es visible como tipos diferentes de colonias. A partirde colonias separadas suficientemente es posible obtener un cultivo puro de cada uno de los tipos de bacterias presentes en la muestra original.

MATERIAL
1. 5 cajas de petri
2. Frasco de dilución
3. Cuatro tubos con tapón de rosca
4. 5 pipetas 1 de 10 ml y 4 de 1 ml
5. Medio de cultivo
DIAGRAMA DE FLUJO DE PROCEDIMIENTO90 ml Agua destilada 10 ̄ᶦ 9ml 10 ̄² 9ml 10 ̄ᶟ 9ml 10 ̄⁴ 9ml 10 ̄⁵
10 ̄ᶦ 10 ̄² 10 ̄ᶟ 10 ̄⁴ 10 ̄⁵


PROCEDIMIENTO
ESTERILIZAR
*Esterilizar medio de cultivo (aguar nutrivo)
* Pipetas
* Cajas de petri
* Tubos con tapón de rosca
* Frasco de dilución

Una vez esterilizado el material
Vaciar el agar nutritivo en las 5 cajas petri antes de que se coagule
1. Agregamos 90 ml de agua destilada en el frasco de dilución.
2. 9 ml de agua destilada en cada tubo de ensaye.
3. Una vez agregada el agua...