Practica De Protenias

UNIVERSIDAD LA SALLE |
Práctica #3 |
Reacciones de aminoácidos y proteínas |
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Integrantes del equipo y porcentajes de participación: |

Laboratorio de Bioquímica de Macromoléculas;

INTRODUCCIÓN
Varios aminoácidos producen un color característico al contacto con ciertos reactivos. En realidad, estas pruebas indican la presencia dedeterminados grupos funcionales. Resultan pues específicas de dichos grupos funcionales, y no de los propios aminoácidos. Sin embargo, se han empleado mucho estas pruebas por su gran sencillez, y porque, muy a menudo, los aminoácidos son los únicos componentes químicos de los líquidos o tejidos corporales que poseen le grupo funcional en cuestión en cantidad razonable. Así ocurre en particular, en elcaso de las proteínas que dan reacciones coloreadas positivas frente a reactivos específicos de un aminoácido.

Numerosos ensayos químicos sobre las proteínas se basan en reacciones coloreadas. Uno de ellos, el ensayo de Biuret, produce un color rosa o púrpura cuando se trata una solución alcalina de una proteína con una solución de sulfato cúprico; la intensidad del color depende de la cantidad deenlaces peptídicos presentes. Este ensayo es específico para enlaces péptídicos no siendo positivo para los α-aminoácidos y los dipéptidos. Es un ensayo muy conveniente y se usa con gran frecuencia para determinar si ha sido total la hidrólisis de una proteína.

El ensayo xantoproteico es la reacción de formación de un color amarillo cuando se trata una proteína con ácido nítrico concentrado.Este ensayo es simplemente la nitración del anillo aromático de ciertos aminoácidos (tirosina, fenilalanina y triptófano). Otra reacción coloreada de las proteínas es el ensayo de Millon. El reactivo empleado en este ensayo es una mezcla de nitratos mercurioso y mercúrico. Una proteína tratada con el reactivo de Millon y calentada da una coloración roja. Cualquier compuesto fenólico da positivaesta reacción; el ensayo de Millon, como otros basados en reacciones coloreadas, se basa en la presencia de ciertos aminoácidos en la molécula de proteína. La reacción de Millon es específica para el aminoácido tirosina, que contiene un anillo de benceno al que se une el grupo hidroxilo.

También se encuentra la prueba de Hopkins-Cole en la que los derivados indol dan productos de condensacióncuando se tratan con aldehídos aromáticos en presencia de ácido sulfúrico o clorhídrico. El aminoácido triptófano contiene un grupo indol y por eso la reacción es específica para triptófano. Cuando se agrega el reactivo a una solución que contenga triptófano o una proteína con triptófano, y lentamente se añade una capa de sulfúrico concentrado, se formará un anillo de color violeta en la interfasede los líquidos. Proteínas que no contengan triptófano, como la gelatina, darán la prueba negativa. Se desconoce la naturaleza de los productos que se forman. El triptófano puro no da la reacción a menos que contenga indicios de iones férricos o cúpricos. Los cloratos, nitratos, nitritos y cloruros en exceso impiden la reacción.

Los aminoácidos azufrados como la metionina y la cisteína sereconocen por la formación de precipitados de sulfuro de plomo color gris oscuro o negro que se forman cuando reaccionan con acetato de plomo en medio alcalino, esta reacción da coloraciones gris oscuro o negro. Esta reacción se debe a que el medio alcalino en el que están disueltos los aminoácidos contribuye a que estos se carguen positivamente y al agregar el acetato de plomo, estos reaccionan con elanión para formar sulfuro de plomo.

OBJETIVOS
Someter a distintas proteínas y aminoácidos a diferentes pruebas de determinación cualitativa para su identificación, en base a su estructura peptídica y a la presencia de determinados grupos R.

HIPÓTESIS
De acuerdo a la composición de la proteína, será la reacción colorimétrica que se presente.

METODOLOGÍA

Prueba de Biuret
En un...