practica electroforesis

Páginas: 7 (1670 palabras) Publicado: 4 de junio de 2014
PRACTICA #5
ELECTROFORESIS DE DNA
INTRODUCCION
La electroforesis es un proceso que se utiliza para separar macromoléculas en una solución. Muchos procedimientos que evalúan las moléculas de DNA realizan la electroforesis en gel. Esta técnica usa un gel como tamiz molecular para separar los ácidos nucleicos o las proteínas en función de su tamaño ,su carga eléctrica y otras propiedadesfísicas. Como las moléculas de los ácidos nucleicos poseen cargas negativas en sus grupos fosfato ,en un campo eléctrico viajan hacia electrodo .A medida que se mueven, la mayor parte de las fibras poliméricas obstruye el paso de las moléculas mas largas en mayor medida que el de las moléculas mas cortas y ,de esta manera, las separa de acuerdo a su longitud.Por tanto unas propiedades de la moléculaespecialmente la posesión de grupo ionizables, determina como rápidamente un campo eléctrico puede mover la molécula a través de un medio gelatinoso. 
La electroforesis en gel es una de las más importantes herramientas en biología molecular y es de valor crítico en muchos aspectos de la manipulación y estudio genético. Un uso es la identificación de moléculas ADN particulares por los patrones debanda que ellos producen en la electroforesis en gel después se ser cortado con varias enzimas de restricción. ADN viral, plasmídico y segmentos particulares de ADN cromosomal puede ser identificados por esta técnica. Otro uso es la separación y purificación de fragmentos individuales conteniendo genes interesantes, los cuales pueden ser recuperados del gel con actividad biológica completa.

MARCOTEORICO
La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por  en el año 1937, pero su importancia vino a incrementarse cuando en los años cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius , impulsaron laelectroforesis de zona, nombre que se asigno a la separación de materiales en un campo eléctrico en presencia de algún tipo de soporte; aunque este termino se limito originalmente al análisis de coloides y partículas submicroscopicas , se ha convertido en estos últimos años en una metodología aplicada a sustancias de bajo peso molecular.
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta soncolocadas  en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir  cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).
El movimiento de las moléculas esta gobernado también por dos fuerzasadicionales; inicialmente la fricción con el solvente dificultará  este movimiento originando una fuerza que se opone , por otro lado  las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energía  cinética propia denominado  difusión.  La energía cinética de las moléculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusión.
La suma de todasestas fuerzas provoca que las moléculas no migren de una manera homogénea, de tal manera que, si las moléculas son colocadas en un cierto lugar de solución, los iones comenzaran a moverse formando un frente cuya anchura aumentara con el tiempo.
Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de las moléculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento. Unaforma común de hacer esto es formar un gel. El gel consiste de un polímero soluble de muy alto peso molecular que atrapa moléculas de agua y forma un tamiz  que dificulta el movimiento de los solutos, consecuentemente, la migración electroforética de las moléculas será mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido también.
Electroforesis en geles de agarosa. 
La agarosa es un...
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