practica in vitro

Páginas: 5 (1044 palabras) Publicado: 26 de noviembre de 2013

INSTITUTO TECNOLOGICO DEL VALLE DE MORELIA
TARIMBARO MICHOACAN




NOMBRE: VANIA VALERIA CASTILLO OSORNIO

NUMERO DE CONTROL: 13850223


CARRERA: INGENIERIA AMBIENTAL


SEMESTRE: 1 ero GRUPO: 11

ASIGNATURA: BIOLOGIA


FECHA: 1 DE NOVIEMBRE DEL 2013

PROFESOR: CESAR JAVIER LUMBRERAS ROMERO



PRACTICA DE LABORATORIO, PROPAGACION IN VITRO DE VIOLETAAFRICANA (MODO SEMISOLIDO)





INTRODUCCION:

La fecundación in vitro es una técnica de reproducción asistida en la que la fertilización se realiza en exterior del cuerpo, por lo general en una placa de Petri en un laboratorio.
El término "in vitro" significa "en cristal" en latín, y se utilizó para nombrar este procedimiento debido a que en los comienzos de la técnica se utilizabanrecipientes de cristal para realizar las fecundaciones.
También incluyen muchas técnicas destinadas a introducir, multiplicar y regenerar material vegetal.


OBETIVO GENERAL

• Preparar medios de cultivo para el cultivo in vitro de tejidos vegetales





LABORATORIO

Acuérdate que antes de entrar al laboratorio, llevar bata, y/o materiales que te haya pedido el profesor a cargo de lapráctica.
También cualquier sustancia o material agarrado del laboratorio será utilizado cuidadosamente y conscientemente, siguiendo la indicación del profesor.






















MATERIALES UTILIZADOS EN ESTA PRÁCTICA

Vasos precipitados
Mezclador
Agua destilada
100 vasos gerber
Tapaderas gerber
Agar
Bisturí
Horno de microondas
Planta de violeta africanaControlador de PH (HCL y/o CLH)
Autoclave
Balanza analítica
Sacarosa
Cisteína
Alcohol
Cloro
Mechero de bunsen
Pinzas
Cinta adhesiva
Cámara de flujo laminar
Agitador de vidrio
Cubre bocas






















PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO

Primero vamos a pesar las soluciones en un vaso precipitado de 250ml para así mezclarlas

Sustancia
Cantidad
NH4 NO320.6 ml
KNO3
18.8 ml
MGSO4
20 ml
CA(NO3)2
15 mil
MICROS
10 ml
QUELATOS
10 ml
MIONIOSITOL
20 ml
THIAMINA
8 ml
H2PO4
12.6 ml
BA
10 ml
SACAROSA
10 ml
CISTEINA
100 ml
AGAR
12 grs
PH
5.7


Una vez que tengamos las cantidades exactas, lo que vamos hacer es mezclarlas todas.
Diluimos el agar en 1400 ml de agua destilada y poner la mezcla en el horno de microondas por 10min.















Ya una vez hecho eso ahora, mezclamos las soluciones en vaso precipitado de 2000 ml (sacarosa, soluciones y cisteína en 500 ml, agua destilada)
Podemos utilizar un mezclador para más fácil y aforar a 200 ml


















Una vez hay, lo que vamos a hacer es ajustar el PH de nuestra mezcla
(KOH- Parabajar el PH)
(HCL- Para subir el PH)
Y le vamos a ir tanteando hasta que nuestro PH alcance a 5.7

Ya una vez echa toda la mezcla y lista, vamos a vaciar el contenido en frascos gerber con 20 ml cada frasco en medio del cultivo semisólido y tapar.















PROTOCOLO DE ESTERIALIZACION


En este protocolo lo que vamos hacer es meter los 100 frascos gerber ya con el mediode cultivo semisólido, en el autoclave y lo que vamos a hacer va ser
Checar Nivel de agua
Purgar Equipo
Cerrar Válvula de Purgado
Hasta que llegue a 20 lbs de presión
Esperar 15 min. Mas y listo (Apagar)

La esterilización puede durar de 1 hora a 1 hora y media, hasta que llegue a las 20 lbsPROTOCOLO DE SIEMBRA

Ya que elaboramos nuestro protocolo de esterilización, ahora vamos a dirigirnos a esterilizar los esplantos de la planta que vamos a cultivar, que en este caso es la violeta africana, acuérdate de entrar con cubre bocas para no contaminar el...
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