Practica Josue Dominguez

Páginas: 7 (1698 palabras) Publicado: 10 de noviembre de 2015










MANUAL DE
PRÁCTICAS DE LABORATORIO













IBT

Estancia II


FICHA TECNICA




FICHA TÉCNICA Estancia II

Fecha: 09-Sep-2015

Nombre del catedrático:
Ma. Montserrat Loredo Guillén
Nombre de las prácticas:
Preparación de medios de cultivos, tinción Gram, aislamiento en 4 cuadrantes.
Clave:

Número de práctica:
01 02
Duración en horas:
4hrs
Justificación:
Tener los principalesmedios de cultivo para el aislamiento de microorganismos para su futuro uso.
Objetivos/Resultados de
aprendizaje:
Preparar los medios de cultivo necesarios para el aislamiento de microorganismos.
Laboratorio donde se desarrolló la práctica:
Laboratorio de Ingeniería (Laboratorio 7 en LT2)
Actividades a desarrollar:
-Preparación de medios de cultivo para hongos, levaduras y bacterias.
Evidencia agenerar en el desarrollo de la práctica:
Reporte de práctica por equipo.


COMPETENCIAS HABILIDADES


Trabajo en equipo Preparación de medios de cultivo











Elaboró: Ma. Montserrat Loredo Guillén Revisó:





INTRODUCCIÓN



Preparación de Medios de Cultivo

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientesindispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían considerablemente.  Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales  y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
Existenmedios cuya composición permite el crecimiento de:
1.    un gran número de especies (agar nutritivo, caldo ordinario, agar de Sabouraud),
2.    determinados microorganismos (impidiendo el desarrollo de otros), son los denominados medios selectivos.
3.    Otros en cambio, se desarrollan para el estudio de determinadas pruebas fisiológicas o test bioquímicos (utilización de citratos, acidificación apartir de azúcares, etc.).
 
Los medios de cultivo poseen una serie de componentes:
1.    Indispensables: Entre los primeros se incluye el agua, nutrientes orgánicos (hidratos de carbono, aminoácidos, vitaminas, etc) y nutrientes inorgánicos (P, Fe, N, Mg, S, etc)
2.    Alternativos: sustancias isosmotizantes (NaCl), agente solidificante (agar-agar), tampones, indicador de pH, etc.AISLAMIENTO Y SEMBRADO EN 4 CUADRANTES
Estriado por cuadrantes: se divide la parte inferior de la caja Petri en cuatro partes iguales con un marcador. Se esteriliza el asa y se estría el 1er cuadrante con el procedimiento básico de S. Se trabaja en el sentido de las agujas del reloj, estriando cuadrante por cuadrante, esterilizando el asa antes de seguir a otro.
TINCION DE GRAM
Las bacterias Gramnegativas pierden un colorante (el cristal violeta) con mayor facilidad que las Gram positivas. La razón es la menor cantidad de mucopéptido de las paredes de las bacterias Gram negativas.
La diferenciación se hace añadiendo pequeñas cantidades de etanol a las células teñidas con cristal violeta. El citoplasma de las células que han perdido el cristal violeta se tiñe con otro colorante (safranina). Ladiferencia de color se relaciona con el tipo de pared bacteriano: células de color violeta (bacterias de pared Gram positivas) y células de color rosa (bacterias de pared Gram negativa).
En realidad la diferencia de color no es específica de la pared bacteriana: todas las células sin pared (como las animales) pierden fácilmente el cristal violeta (se verán de color rosa). Todas las células conpared gruesa (como las de hongos) se verán de color violeta. La correlación entre el color y el tipo de pared solo tiene sentido con células bacterianas (salvo excepciones).
El cristal violeta es básico (se une a componentes celulares de carga negativa). Atraviesa la envuelta celular y se acumula en el citoplasma. Para facilitar la diferenciación se mezcla lugol con cristal violeta: el complejo...
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