Practica laboratorio 3er y 5to año

PRÁCTICAS DE LABORATORIO
DE GENÉTICA
Duración:
Cinco sesiones de aprendizaje y una sesión examen de 2 h/c.u.
Contenido:
Se realizarán dos prácticas, una sobre la “Segregación de Caracteres” utilizando
Drosophila melanogaster como organismo experimental.
Práctica 1: Segregación de Caracteres (observación de la segregación independiente
frente a la segregación de genes ligados).Objetivos didácticos:
1) Aprender el manejo de un organismo experimental, en concreto, D.
melanogaster.
2) Aprender a realizar cruzamientos en D. melanogaster.
3) Aprender el uso de la lupa binocular.
4) Observar el resultado de la uniformidad de la generación filial cuando se
cruzan líneas puras.
5) Observar el resultado de una segregación independiente frente a una
segregaciónde genes ligados.
6) Aplicar el análisis estadístico a los resultados experimentales (prueba de chi2).
Material: Lupas y 4 cepas mutantes de D. melanogaster (pupas y adultos).
Desarrollo de las sesiones de prácticas:
Se realizarán en 5 sesiones semanales consecutivas de 2 horas/c.u.
1ª semana: Empezar la primera práctica. Presentación del organismo experimental y
explicación del usode la lupa binocular. Realización de dos cruces por pareja (se
trabajará con 4 cepas portadoras de una mutación recesiva cada una. Se realizará el
cruce de una de ellas con otras dos, de tal manera que un cruce será entre genes
ligados y el otro no) (2 h).
2ª semana: Respecto a la primera práctica, matar generación parental (0.5 h).
Empezar segunda práctica. Explicación de lautilización del microscopio y
observación de preparaciones de cromosomas politénicos para detectar inversiones
(1.5 h).
3ª semana: Respecto a la primera práctica, observación de las F1, interpretación del
resultado y realización de un nuevo cruce entre machos y hembras de la F1 (1 h).
Desarrollo teórico de los resultados esperados de los distintos cruces (1 h).
4ª semana: Respecto a laprimera práctica, matar generación F1 (0.25 h).
Respecto a la segunda práctica, disección de larvas, preparación de cromosomas
politénicos y observación (1.75 h).
5ª semana: Respecto a la primera práctica, recuento de la F2 e interpretación de los
resultados (el análisis estadístico se realizará en casa y se entregarán junto con el
resumen) (1 h).
PARTE I
Segregación de caracteres enDrosophila melanogaster
Introducción al organismo modelo Drosophila melanogaster
Razones para el uso de Drosophila:
Hay muchas razones que hacen de D. melanogaster (Figura 1) un organismo
idóneo para la experimentación:
-Es muy abundante y de fácil captura.
-Se cultiva fácilmente en el laboratorio.
-Produce gran cantidad de descendientes (adecuado para comprobar las
proporcionesmendelianas).
-A 25°C se completa el ciclo biológico en 10-11 días.
-Solamente posee 4 pares de cromosomas.
-Tiene cromosomas gigantes en las glándulas salivares y otros tejidos de la larva,
lo que facilita su observación microscópica.
-Se trabaja con ella desde 1905 y por lo tanto se dispone de una abundante
bibliografía.
-Hay una gran cantidad de mutantes, tanto naturales como inducidos,y muchas
cepas especiales que permiten cuidadosos análisis genéticos.
Medios de cultivo:
Las moscas en estado salvaje se alimentan de levaduras que fermentan los jugos
de las plantas. Para la captura de individuos en la naturaleza se puede preparar una
papilla con plátano machacado, harina y levadura de pan.
En el laboratorio Drosophila puede cultivarse en botellas estériles con unacomida
preparada a base de harina de maíz, azúcar, levadura y agar como espesante. Para evitar
contaminaciones se añade un fungicida, normalmente Nipagín (metil p-oxibenzoato), y un
bactericida (ácido propiónico).
Una vez solidificada se le añade levadura picada (para proporcionar una fuente de
proteínas a las larvas) y un papel en zigzag (para que absorba la humedad y como
superficie...