Practica: leucemias

Practica # 6
TIEMPO DE TROMBOPLATINA PARCIAL ACTIVADA
(TPT)

OBJETIVO.
APLICAR LAMETODOLOGIA DE LA TECNICA ADECUADA PARA REALIZAR EL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA ACTIVADA, EN VALORACION DE LA FUNCION HEMOSTATICA.

MATERIAL.
* GRADILLAS
* TUBOS DE ENSAYECON ANTICOAGULANTE CITRATO DE SODIO AL 3.8%
* TUBOS DE ENSAYE DE 10 X 75MM
* TORUNDAS DE ALGODÓN
* CRONOMETRO
* PIPETAS SEMIAUTOMATICAS DE 100UM Y 200UM
*CANULAS

EQUIPO.
BAÑO MARIA A 37°C

MATERIAL BIOLOGICO.
3ML DE SANGRE VENOSA CON ANTICOAGULANTE CITRATO DE SODIO AL 3.8% (DILUCION 1:10)

REACTIVOS.
* TROMBOPLTINAPARCIAL LIQUIDA ACTIVADA
* CLORURO DE CALCIO AL 0.02M
* CITRATO DE CALCIO AL 3.8%


DESCRIPCION.

1) SE EXTRAEN 3ML DE SANGRE, SE VACIAN EN UN TUBO CONANTICOAGULANTE CITRATO DE SODIO, Y SE MEZCLA POR INVERSION.

2) CENTRIFUGAR LA SANGRE A 1500RPM DURANTE 5MIN

3) CON UNA CANULA ASEGURADA EN UNA JERINGA, SEPARAR EL PLASMAPASANDOLO OTRO TUBO LIMPIO Y SECO.

4) COLOCAR 0.1ML DE TROMBOPLASTINA LIQUIDA (TP) EN UN TUBO DE ENSAYE DE 10 X 75MM; INCUBAR POR 3MINUTOS EN BAÑO MARIA A 37°C.

5)AGREGAR 0.1ML DEL PLASMA PROBLEMA O CONTROL, MEZCLE BIEN Y DEJE INCUBAR POR 2MINUTOS.

6) POSTERIORMENTE AGREGAR 0.1ML DE CLORURO DE CALCIO 0.02 M., PREVIAMENTE CALENTADO ENEL BAÑO MARIA E INMEDIATAMENTE PONER EN MARCHA EL CRONOMETRO, MEZCLAR Y REGRESAR EL TUBO AL BAÑO MARIA.

7) TRANSCURRIDOS 30 SEG, SACAR EL TUBO Y AL OBSERVAR LOS PRIMEROSHILOS DE FIBRINA DETENER EL CONOMETRO.

8) REPETIR LA PRUEBA CON OTRO TUBO DE ENSYE Y SACAR EL PROMEDIO DE AMBOS TIEMPOS.

VALORES DE REFERNCIA.

40 A 45 SEGUNDOS.