Practica no. 2 analitica experimental, grado alcoholico

Practica NO. 3 DETERMINACION DEL GRADO ALCOHOLICO EN BEBIDAS POR CROMATOGRAFIA DE GASES

* INTRODUCCION
Como parte del el control de calidad de diversas bebidas con contenido alcohólico, se lleva a cabo la estimación de la cantidad de etanol contenida, o también llamado grado alcohólico.
Existen diferentes técnicas que nos posibilitan conocer este valor como pueden ser el análisisvolumétrico o la cromatografía de gases.
Como ya hemos visto en la práctica no.1, la cromatografía de gases es un método de análisis cuantitativo en el cual la separación de los analitos se efectúa mediante la elución de de estos en fase gas.

Para conocer la concentración de un analito mediante cromatografía de gases se puede utilizar dos técnicas: 1) estándar externo y 2) estándar interno.
Antesde aplicar cualquiera de esto dos métodos es necesario llevar a cabo una normalización del área obtenida de la siguiente forma.
1. normalización simple de área

A B C

% A (p/p) = Area A/Area total x 100
Este procedimiento normalmente no es válido por las siguientes razones:
* se asume que cada pico tiene el mismo factor de respuesta en el detector
* se asume que las áreas delos picos considerados representan el 100% del área

2. Normalización de área mediante el cálculo de los factores de respuesta

En este caso se asume que se dispone de los diferentes componentes que deben ser cuantificados, de modo de analizarlos separadamente para determinar sus factores de respuesta.

Área
C
A
B


Concentración


FR,A = Área/concentración
Usode estándar externo
En este caso los factores de respuesta (FR,x)se calculan por normalización del área de cada pico con relación al pico utilizado como referencia:
FR,x = Areax/AreaREF
Conc.x = FR,x (conc.REF) = FR,x (Areax/AreaREF)
El procedimiento implica:
* trazar una curva de calibración utilizando un estándar de referencia, luego analizar la muestra con el componente en cantidaddesconocida
* el procedimiento requiere reproductibilidad en la inyección de cada muestra
* no es tan usado en cromatografía gaseosa como lo es en HPLC

Uso de estándar interno

Muestra

SI
Muestra con estándar
Interno

El método consiste en preparar e inyectar muestras del estándar interno y del analito de interés y luego graficar una curva de calibración utilizando el estándarinterno. Para ello se debe:
1. realizar un agregado exacto del estándar interno a la muestra desconocida
2. cromatografiar la mezcla
3. calcular la relación de áreas
4. determinar la relación de concentraciones y los factores de respuesta a partir de la curva de calibración
5. determinar la concentración del analito problema
Areax = FRx (Conc.x)
AreaSI = FRSI (ConcSI)
Conc.x =(Areax/AreaSI) (Conc.SI/FRx)
Requerimientos:
* el estándar debe ser un compuesto puro
* los picos deben estar bien resueltos en las condiciones de GC utilizadas
* el compuesto utilizado como estándar nunca debe estar presente en la muestra a analizar
* el compuesto utilizado como estándar debe encontrarse en concentraciones similares a los de los componentes que se desea cuantificar* METODOLOGIA
Para el análisis del grado de etanol en una muestra comercial se utilizo el cromatografo de gases (Shimadzu) analizando los analitos mediante el uso de etanol como estándar externo y acetona como estándar interno.
1. Estándar externo
Se realizo una curva de Etanol como estándar externo con as siguientes concentraciones: 2%, 4%, 6%, 8% y 10% . La muestra se trato ydiluyo con un factor de dilución 3:210. Las muestras se inyectaron al cromatografía de gases con un volumen de (que volumen fue oscar?)

2. Estándar Interno
Se realizo una curva de estándar interno utilizando las mismas concentraciones de etanol que en el estándar interno y además Acetona al 6%. La muestra se trato de la misma manea que el estándar externo, teniendo un factor de dilución...