Practica reporte

Introducción.
Todas las células contienen la información necesaria para realizar distintas reacciones químicas mediante las cuales las células crecen, obtienen energía y sintetizan sus componentes. Está información está almacenada en el material genético, el cual puede copiarse con exactitud para transmitir dicha información a las células hijas. Sin embargo estas instrucciones pueden sermodificadas levemente, es por eso que hay variaciones individuales y un individuo no es exactamente igual a otro de su misma especie (distinto color de ojos, piel, etc.). De este modo, podemos decir que el material genético es lo suficientemente maleable como para hacer posible la evolución.
La información genética o genoma, está contenida en unas moléculas llamadas ácidos nucleicos. Existen dos tiposde ácidos nucleicos: ADN y ARN. El ADN guarda la información genética en todos los organismos celulares, el ARN es necesario para que se exprese la información contenida en el ADN; en los virus podemos encontrar tanto ADN como ARN conteniendo la información (uno u otro nunca ambos).Alberts, B et al. (1996)


Objetivo.
Aislar el ácido nucleico desoxiribonucleico (ADN) a partir de célulashepáticas (hepatocitos) e identificar por pruebas colororimétricas algunos de sus componentes básicos.




Desarrollo.
Primero se pesaron 50 gramos de hígado, se cortaron en trozos pequeños, y se pasaron a un vaso de licuadora y se le añadió 100 ml de agua destilada fría más 10 gramos de sal común. Después se licuo a máxima velocidad por aproximadamente 30 segundos, luego se filtro a través de unacapa fina de gasa colocada sobre un embudo Buchner, usando la bomba de succión. El filtrado se paso a un vaso de precipitados de 250 ml y se le añadió 25 ml de solución detergente.se mezclo por 3 minutos lentamente y con cuidado el filtrado y la solución detergente usando una varilla de vidrio, y tratando de que lo que estábamos revolviendo no se hiciera espuma. Y se dejo reposando 10 minutos.sepaso la mezcla a un tubo de ensayo llenando solamente 1/3 del volumen del tubo de ensayo y añadir una pizca o pequeña cantidad de enzima proteasa, agitando el tubo suavemente.
Ladear el tubo de ensayo y lentamente y por las paredes del tubo ir virtiendo alcohol etílico frío en una cantidad igual al volumen del filtrado que ya hay en el tubo. Dejar reposar la mezcla por 30 minutos mínimo ycolectar el ADN usando un palillo largo de madera para extraerlo del tubo
HIDRÓLISIS DEL ADN E IDENTIFICACIÓN DE SUS COMPONENTES

A.- IDENTIFICACIÓN DEL AZUCAR PENTOSA
tomamos 0.2 gr. Del precipitado obtenido, colocarlo en un tubo de ensayo y le añadimos 2 ml. De H2SO4 13 N. Hervimos a la flama del mechero, agitando durante 10 min. Con una pipeta pasteur retiramos una porción de lo que se hidrolizo.Se colocaron 6 gotas del hidrolizado en un tubo de ensayo pequeño añadiéndole .5 ml de reactivo de vial y agitándolo.
B.- IDENTIFICACIÓN DE FOSFATO

Se tomó con una pipeta pasteur un ml del hidrolizado pasándolo a un tubo de ensayo, se le añadió .5 ml de H2SO4 y un ml de molbidato de amonio.se le añadió un ml de reactivo de fiske-subarow y dejar reposar 10 min.

Resultados esperados.
Paso 1Si el procedimiento fue llevado a cabo de manera apropiada tal y como se describe en la práctica , observaras que el ADN (en forma de una sustancia blanca filamentosa, de aspecto viscoso) se desprendió de la muestra y se eleva hasta la superficie de la capa de alcohol, desde donde puede ser recuperada usando el palillo. Eso es lo que se debió observar en el paso 1 de la practica el cual si seobservó pero a falta de una porción de solución que no se encontraba accesible en el laboratorio no se vio en un 100% bien.
Paso 2
La presencia de azúcar pentosa (desoxiribosa), que contiene el ADN, se manifiesta por la aparición de un color verde azuloso, debido a la reacción del furfural (producido al usar H2SO4 sobre el carbohidrato), más el orcinol que contiene el reactivo de Bial. Tuvo...