Practica Sangre
Páginas: 6 (1436 palabras)
Publicado: 23 de junio de 2015
Informe de Fisiología
Objetivo
Reconocer algunas propiedades que goza la sangre en actividad y algunas características funcionales.
2. Material
Material Biológico: Alumno voluntario
Material Químico: Anticoagulante Oxalato de Potasio al 2 %
Solución de Turk (diluyente para leucocitos)
Solución de Hayen (diluyente para eritrocitos)
Soluciónde NH4OH al 0.4 %
Alcohol y algodón
Kit de reactivos para grupo sanguíneo
Material de vidrio: Cámara de Neubawer: cuenta leucocitos y eritrocitos
Tubos de Wintrobe para hematocrito
Tubos de Cuttler (Vel. De sedimentación)
Micropipetas de Salí (Dopaje de Hemoglobina)
Tubos de ensayo x 15 mL.
Pipetas cuenta glóbulos rojos y blancos
Láminas portaobjetos
Láminas cubreobjetos
Láminas cóncavas deporcelana, para determinación de grupo sanguíneo
Equipos: Centrífuga
Fotocolorímetro
Microscopio
3. Procedimiento
Obtención de la muestra de sangre
En primer lugar, se hace una limpieza de la zona elegida con alcohol yodado y luego se introduce la aguja en el vaso sanguíneo superficial. La muestra extraída se extravasa a un recipiente que contenga un anticoagulante y luego agitar para que sehomogenice.
Recuento de Glóbulos Rojos
Se utiliza un tubo de goma para la pipeta, se succiona sangre hasta la señal 0.5, limpiando el exceso de sangre que haya quedado alrededor de la pipeta, diluyendo con la solución de Hayen.
Luego se llena la pipeta con la solución de sangre será igual a 1/700. Esta dilución debe ser exacta, ya que de ello dependerá la veracidad de los resultados. Se quita eltubo de goma de la pipeta y se tapone ambos extremos con los dedos de la mano, mezclando el contenido con mucho cuidado. El recuento deberá llevarse a cabo después de realizar la dilución y si esto no fuera posible debe agitarse nuevamente antes del recuento.
Descartar las primeras gotas de la dilución antes de llenar la cámara. Colocar una gota en el borde del cubreobjeto de la cámara de talmanera que el líquido fluya por debajo, llenándose de esta manera la cámara de Neubawer. Poner la cámara en el microscopio y a un aumento de 45x, contar en los cuatro campos de las esquinas y al centro de los 16 cudadraditos cada uno. Calcular el número de células por cada cuadrado (5 x 16 = 80).
Calcular dimensiones de la cámara y el grado de dilución, constituyen la base del cálculo. Cada uno de loscuadraditos más pequeños tiene una superficie de 1/400 nm2, de los cuales se han contado 80. La profundidad es de 1/10 nm y la dilución es de 1/200, por lo que la fórmula para calcular el número de hematíes por nm3 sería la siguiente:
ó
Recuento de Glóbulos Blancos
Se siguen los pasos para el recuento de glóbulos rojos, con la diferencia de:
La pipeta de glóbulos blancos se llena con lamuestra de sangre hasta la señal de 0.5 y se diluye con la solución de Turk hasta la marca 11, quedando de esta manera la solución de 1/20.
Llenar la cámara con el líquido y comenzar el conteo con pequeño aumento de las cuatro esquinas y sumarlos.
La altura de la cámara es de 0.1 nm, el grado de dilución es de 1/20 por lo que para el cálculo de los glóbulos blancos por nm3 será utilizada lasiguiente fórmula:
Hematocrito
Colocar en u tubo de Wintrobe sangre oxalatada hasta la marca de 100, centrifugar por 15 minutos a 3000 r/m, hasta que el número de hematíes permanezca estable, luego leer o hacer la lectura dada por el límite superior de glóbulos rojos en la escala graduada. Los valores normales son:
Lactantes 44 a 62 %
Niños 35 a 47 %
Varones adultos 40 a 45 %
Mujeres adultas36 a 45 %
Dosaje de Hemoglobina
Colocar en la micropipeta para el dopaje de hemoglobina 0.2mL, de la muestra de sangre y luego frotarlo varias veces en un tubo de ensayo que contiene la solución de hidróxido de amonio al 0.4 %. Después aforar a 5mL con dichas solución. Dejar en reposo unos cinco minutos aproximadamente, para posteriormente leerse en el fotocolorímetro.
La lectura dada por...
Informe de Fisiología
Objetivo
Reconocer algunas propiedades que goza la sangre en actividad y algunas características funcionales.
2. Material
Material Biológico: Alumno voluntario
Material Químico: Anticoagulante Oxalato de Potasio al 2 %
Solución de Turk (diluyente para leucocitos)
Solución de Hayen (diluyente para eritrocitos)
Soluciónde NH4OH al 0.4 %
Alcohol y algodón
Kit de reactivos para grupo sanguíneo
Material de vidrio: Cámara de Neubawer: cuenta leucocitos y eritrocitos
Tubos de Wintrobe para hematocrito
Tubos de Cuttler (Vel. De sedimentación)
Micropipetas de Salí (Dopaje de Hemoglobina)
Tubos de ensayo x 15 mL.
Pipetas cuenta glóbulos rojos y blancos
Láminas portaobjetos
Láminas cubreobjetos
Láminas cóncavas deporcelana, para determinación de grupo sanguíneo
Equipos: Centrífuga
Fotocolorímetro
Microscopio
3. Procedimiento
Obtención de la muestra de sangre
En primer lugar, se hace una limpieza de la zona elegida con alcohol yodado y luego se introduce la aguja en el vaso sanguíneo superficial. La muestra extraída se extravasa a un recipiente que contenga un anticoagulante y luego agitar para que sehomogenice.
Recuento de Glóbulos Rojos
Se utiliza un tubo de goma para la pipeta, se succiona sangre hasta la señal 0.5, limpiando el exceso de sangre que haya quedado alrededor de la pipeta, diluyendo con la solución de Hayen.
Luego se llena la pipeta con la solución de sangre será igual a 1/700. Esta dilución debe ser exacta, ya que de ello dependerá la veracidad de los resultados. Se quita eltubo de goma de la pipeta y se tapone ambos extremos con los dedos de la mano, mezclando el contenido con mucho cuidado. El recuento deberá llevarse a cabo después de realizar la dilución y si esto no fuera posible debe agitarse nuevamente antes del recuento.
Descartar las primeras gotas de la dilución antes de llenar la cámara. Colocar una gota en el borde del cubreobjeto de la cámara de talmanera que el líquido fluya por debajo, llenándose de esta manera la cámara de Neubawer. Poner la cámara en el microscopio y a un aumento de 45x, contar en los cuatro campos de las esquinas y al centro de los 16 cudadraditos cada uno. Calcular el número de células por cada cuadrado (5 x 16 = 80).
Calcular dimensiones de la cámara y el grado de dilución, constituyen la base del cálculo. Cada uno de loscuadraditos más pequeños tiene una superficie de 1/400 nm2, de los cuales se han contado 80. La profundidad es de 1/10 nm y la dilución es de 1/200, por lo que la fórmula para calcular el número de hematíes por nm3 sería la siguiente:
ó
Recuento de Glóbulos Blancos
Se siguen los pasos para el recuento de glóbulos rojos, con la diferencia de:
La pipeta de glóbulos blancos se llena con lamuestra de sangre hasta la señal de 0.5 y se diluye con la solución de Turk hasta la marca 11, quedando de esta manera la solución de 1/20.
Llenar la cámara con el líquido y comenzar el conteo con pequeño aumento de las cuatro esquinas y sumarlos.
La altura de la cámara es de 0.1 nm, el grado de dilución es de 1/20 por lo que para el cálculo de los glóbulos blancos por nm3 será utilizada lasiguiente fórmula:
Hematocrito
Colocar en u tubo de Wintrobe sangre oxalatada hasta la marca de 100, centrifugar por 15 minutos a 3000 r/m, hasta que el número de hematíes permanezca estable, luego leer o hacer la lectura dada por el límite superior de glóbulos rojos en la escala graduada. Los valores normales son:
Lactantes 44 a 62 %
Niños 35 a 47 %
Varones adultos 40 a 45 %
Mujeres adultas36 a 45 %
Dosaje de Hemoglobina
Colocar en la micropipeta para el dopaje de hemoglobina 0.2mL, de la muestra de sangre y luego frotarlo varias veces en un tubo de ensayo que contiene la solución de hidróxido de amonio al 0.4 %. Después aforar a 5mL con dichas solución. Dejar en reposo unos cinco minutos aproximadamente, para posteriormente leerse en el fotocolorímetro.
La lectura dada por...
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