Practica sobre fagocitosis

Con el fin de realizar la observación del proceso de fagocitosis, por las células fagocitarias, especialmente los leucocitos polimorfonucleares neutrofilos, se ha realizado esta práctica, lapreparación de las células tratándolas con levaduras opsonizadas, a continuación se explican los pasos seguidos para esto.
Solución de NBT
1.- primero se preparo una suspensión de NBT al 0.1% en soluciónsalina fisiológica, adicionándole 85 mg de sal
2.- posteriormente se le agrego 0.5g de safranina, disuelta en 100 ml de agua
3.- posteriormente se pusieron las muestras a centrifugar a 3000 rpmpor 5 minutos
4.- después del tiempo de centrifugado, se procedió eliminar el sobrante
De los alícuotas con solución salina fisiológica,
5.- una vez eliminado en exceso, se procedió a un segundocentrifugado (lavado de las levaduras), y una vez más se elimino el sobrante y se puso a refrigeración para su posterior uso

Preparación de los portaobjetos
1.- en este paso se procedió a lavar 10porta objetos con detergente en polvo, enjuagarlos con agua destilada, dejarlos secar y marcar 3 círculos sobre cada portaobjeto, uno destinado al grupo control, uno más a levaduras opsonizadas, yfinalmente el tercero a las levaduras no opsonizadas

Preparación de las monocapas de células y Estimulación de las células (
1.- primeramente se tomaron 5 mil de sangre venosa, depositándolas en untubo de vidrio, junto con 10 perlas de vidrio, mesclando el contenido del tubo hasta que se formo la fibrina, pero evitando la coagulación
2.- posteriormente, se tomaron 100 microlitros de la sangredesfibrinada, depositándola en el centro de cada circulo marcado en el portaobjetos, enseguida se colocaron portaobjetos en cajas de petri con papel humedecido, y después fueron incubadas a 37 °Cdurante 30 min.
3.- después de la incubación, se procedió a escurrir el exceso de sangre desfibrinada, lavándolas con solución salina, el lavado se realizo por oscilación al aire, este proceso se...