Practica N 2 Tincion Gram 1

UNIVERSIDAD NACIONAL
AGRARIA LA MOLINA





INFORME Nº2
TITULO: Tinción Diferencial de Gram

Integrantes:
20100116 Hinostroza Vegas, Yessica Lorena
20091003 Lazaro Sudario, Erick
20111370 Matheus Diaz, Shessira
20120124 Rimachi Daza, Elvis


Mesa:
2

Grupo:

Miércoles 3-5 pm



2013

I. INTRODUCCIÓN
En 1884 el bacteriologo danes Hans Christian Gram decubrio empiricamente unatincion difernecial de gran valor practico, que mas tarde se denomino Tincion de Gram, existen muchos variaciones que se le ha desarrollado a este tipo de tincion , pero en todos los casos se presentan pasos esenciales: la extension de celulas, fijadas por el calor leve sobre un porta, por consiguiente se tiñe con un colorante basico, el violeta de cristal, y con una disolucion de yodo. La preparacionse trata con un disolvente organico(alcohol-acetona). Las bacterias gram-positivas resisten la decoloracion y permanecen teñidas de un color oscuro-negro, las bacterias grma-negativas son rapida y complemantamente decoloradas. Al realizar este procedimiento de tincion es esencial examinar celulas en crecimiento, ya que ciertas bacterias gram-positivas (por ejemplo, bacillus spp.) pierdenrapidamente la capacidad de retener el complejo del violeta cristal-yodo una vez que cesa el crecimeinto activo. El resultado de la tincion esta, por lo tanto, condiconadoen cierta medida al estado fisiologico de la celula, pero tambien se corresponde con diferencias fundamentales en la composicion quimica y en la ultraestructura de las paredes celulares de las eubacterias. El grupo de las gram-negativases mayor y mas diverso, que el grupo de las gram- positivas; el grupo de los molicutes es muy pequeño.
Esta practica nos ayuda a diferencia de una manera practica los diferentes tipos de bacterias, y en especial el motivo de las diferencias entre ellas, cuales son los componentes de sus estrcuturas, es importamte su estudio ya que las bacterias en el campo de la salud y economia, su presenciadestaca.








II. OBJETIVOS


Demostrar a través de la técnica de tinción diferencial de Gram la existencia de dos grupos principales de bacterias.


III. MARCO TEÓRICO

TINCIÓN DE GRAM
La tinción de Gram es la técnica más utilizada para el examen microscópico de las bacterias. Una gran mayoría de bacterias importantes clínicamente pueden detectarse con este método, las únicas excepciones son losmicroorganismos que se hallan casi con exclusividad dentro de las células huésped, microorganismos que carecen de pared celular y de los que tienen un tamaño insuficiente para poder ser observados con el microscópico óptico.

Esta tinción fue creada por Hans Christian Gram a fines del siglo XIX y puede utilizarse para separar la mayoría de las especies bacterianas en dos grandes grupos, las quecaptan el colorante básico, cristal violeta (GRAM POSITIVAS), y las que pierden ese colorante por lavado con el decolorante alcohol o acetona (GRAM NEGATIVAS).

El procedimiento clásico de esta tinción consiste en la fijación del material orgánico a la superficie del portaobjetos por medio de calor o con metanol, después de esto se comienza con los pasos de la tinción de gram, con la figura 1 seexplicará cada uno de pasos.



















1. Fijar el material sobre el portaobjetos con metanol o calor. Si se fija con calor, dejar que se enfríe antes de aplicar el colorante.
2. Cubrir el portaobjetos con cristal violeta (violeta de genciana) (violeta) (púrpura) y dejarlo sin secar durante 30 segundos.
Enjuagar el portaobjetos con agua destilada y eliminar todo exceso.
3. Cubrir elportaobjetos con yodo para aumentar la afinidad del violeta de genciana y dejarlo sin que se seque el doble del tiempo que estuvo el cristal violeta en contacto con el portaobjetos.
Enjuagar con agua destilada y eliminar el exceso,
4. Cubrir el portaobjetos con decolorante durante 10 segundos y enjuagar de inmediato con agua destilada. Repetir este procedimiento hasta que no salga más colorante azul del...