Practica

Prácticqa1.- Preparación de disoluciones y medios fisiológicos

I.- Introducción

El objetivo de esta práctica es crear una disolución tampón de unas determinadas características y comprobar su capacidad tamponadora.

Un tampón permite que el pH de una disolución se mantenga estable, haciendo que necesarias grandes cantidades de ácidos o bases para modificar el pH. Esto tiene gran utilidaden los seres vivos permitiendo que los procesos metabólicos se puedan realizar sin que den lugar a cambios bruscos de pH que resultaría fatal para el organismo.

Bibliografía consultada: Guión de prácticas

II.- Parte experimental

Para esta práctica hemos usado los siguientes productos e instrumentos:

•Preparación del tampón - Comprobación de la capacidad tamponadora

KH2PO4 (fosfatomonopotásico) Tampón fosfato 0,1 M, pH 7,0

K2HPO4 (fosfato bipotásico) Agua destilada

Agua destilada HCl 0,2 N

Papel de pesar NaOH 0,2 N

Vaso de precipitado Naranja de metilo

Barra magnética Fenolftaleina

Probeta graduado matraz Soporte con pinzas

Pipetas Pasteur Pipetas graduada de vidrio (Trimex VQI) + Pera

Ácido clorhídrico y potasa concentrada Bureta recta

EspátulaVaso de precipitado

Barra magnética

Instrumentos: Granatorio (Precisa 310M)

pHmetro (Basic20T Crisun)

Magnetoagitador (SBS A-06)

Procedimiento:

a) Preparación del tampón:

- Pesamos en el granatorio (colocando previamente un papel de pesar y tarando el granatorio una vez colocado el papel) 0,605 g de K2HPO4 y 0,835 g de KH2PO4.

- Ponemos en un vaso de precipitado 80 ml deagua destilada y añadimos las cantidades anteriormente pesadas de K2HPO4 y KH2PO4.

- Metemos la barra magnética en la mezcla y ponemos el vaso de precipitado encima del magnetoagitador para que se mezcle todo bien

- Mientras se mezcla la disolución, calibramos el pHmetro con las dos disoluciones patrón.

- Una vez calibrado, usamos el pHmetro en nuestra disolución y anotamos el pH marcado(6,67)

- En función del pH obtenido añadimos ácido clorhídrico o potasa concentrada gota a gota y mientras se sigue mezclando con la barra magnética. Vamos añadiendo hasta conseguir el pH pretendido (7,0)

- Introducimos la disolución en una probeta graduada y enrasamos con agua destilada hasta 100 ml.

b) Comprobación de la capacidad tamponadora:

- Añadimos 5 gotas de naranja de metilo a20 ml de tampón en un vaso de precipitados que colocaremos con la barra magnética en el agitador magnético.

- En una bureta colocamos HCl 0,2 N y abrimos para que vaya cayendo gota a gota hasta observar que la disolución cambia de color. En cuanto cambia de color cerramos la llave reguladora y medimos el volumen que hemos usado.

- Repetimos el mismo proceso con 5 gotas de naranja de metilo y20 ml de agua destilada

- También repetimos el mismo proceso con NaOH 0,2 N en el agua y el tampón junto con las 5 gotas de naranja de metilo.

- Utilizaremos también el procedimiento anterior con 5 gotas de Fenolftaleina en vez de naranja de metilo

- Resumiendo, tendremos que hacer 8 veces el mismo proceso:

- HCl + Agua destilada + Naranja de metilo - NaOH + Agua destilada + Naranjade metilo

- HCl + Tampón + Naranja de metilo - NaOH + Tampón + Naranja de metilo

- HCl + Agua + Fenolftaleina - NaOH + Agua destilada + Fenolftaleina

- HCl + Tampón + Fenolftaleina - NaOH + Tampón + Fenolftaleina

III.- Datos y cálculos

Pm K2HPO4 = 174,18 g/mol

Pm KH2PO4 = 136,09 g/mol

pKa = 7,21

!
!
!

[K2HPO4] = 0,038 moles/l Pm (K2HPO4) =174,18 g/mol 100 ml ! m=0,6048g

[KH2PO4] = 0,062 moles/l Pm (KH2PO4) =136,09 g/mol 100 ml ! m = 0,8338 g

Volúmenes obtenidos en la comprobación de la capacidad tamponadora:

•HCl para tampón + naranja de metilo = 7,7 ml

•HCl para agua destila + naranja de metilo = 0,2 ml

•NaOH para tampón + Fenolftaleina = 4,4 ml

•NaOH para agua destilada + Fenolftaleina = 0,1 ml

Con los 4 compuestos restantes, HCl +...