practica


PRÁCTICA NÚMERO 4
MANEJO DEL ESPECTROFOTÓMETRO
GENESIS 10


Objetivo
Que el alumno aprenda a utilizar el espectrofotómetro y sus diversas aplicaciones.

Introduccion
LaEspectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza(contaminantes, biomoléculas, etc) y estado de agregación (sólido, líquido, gas). Los fundamentos físico-químicos de la espectrofotometría son relativamente sencillos.
Las moléculas pueden absorberenergía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Esto permite que se inicien ciclos vitales de muchos organismos, entre ellos el de la fotosíntesis en plantas y bacterias. La Mecánica Cuánticanos dice que la luz está compuesta de fotones cada uno de los cuáles tiene una energía:
E fotón = h × n = h × c/l,
Donde c es la velocidad de la luz, n es su frecuencia, l su longitud de onda y h=6.6 10-34 J×s es la constante de Planck. Cuando decimos que una sustancia química absorbe luz de longitud de onda l, esto significa que las moléculas de esa sustancia absorben fotones de esa longitudde onda.
En esta práctica estudiaremos la absorción de luz en el ultravioleta cercano (l»325-420 nm) y en el visible (l»420-900 nm). Cuando una molécula absorbe un fotón en este intervalo espectral,se excita pasando un electrón de un orbital del estado fundamental a un orbital excitado de energía superior. De esta manera la molécula almacena la energía del fotón:
A + h×n ® A
*E(A*) = E(A) +Efotón
Como la energía se conserva, la diferencia de energía entre el estado fundamental de la molécula (A) y su estado excitado (A*) debe ser exactamente igual a la energía del fotón. Es decir, unamolécula sólo puede absorber fotones cuya energía h×n sea igual a la energía de un estado molecular excitado. Cada molécula tiene una serie de excitados discretos (o bandas) que dependen de su...